龍血素B與辣椒素受體交互作用的實(shí)驗(yàn)與建模研究.pdf

1、影響中藥發(fā)展一個(gè)主要的原因是中藥的藥理作用機(jī)制很難用現(xiàn)代科學(xué)理論加以合理的解釋。揭示中藥藥理作用機(jī)制是開發(fā)新藥的基礎(chǔ)性工作之一。 我國(guó)傳統(tǒng)名貴中藥之一的血竭具有鎮(zhèn)痛作用，而且這種鎮(zhèn)痛作用可能部分是通過(guò)其成分龍血素B直接干預(yù)初級(jí)感覺(jué)神經(jīng)元背根神經(jīng)節(jié)(dorsal root ganglion，DRG)細(xì)胞電壓門控性鈉通道，阻礙痛覺(jué)信息傳人而產(chǎn)生的。另一方面龍血素B對(duì)三叉神經(jīng)節(jié)(trigeminal ganglion，TG)細(xì)胞河豚毒

2、素不敏感型鈉通道電流的調(diào)制作用可能也是血竭參與顏面部鎮(zhèn)痛的內(nèi)在機(jī)制。然而龍血素B除了對(duì)電壓門控性鈉通道具有調(diào)制作用可以干預(yù)痛覺(jué)信息傳入外，是否還通過(guò)其它途徑影響痛覺(jué)信息的中樞傳入呢？這是一個(gè)值得進(jìn)一步探討的問(wèn)題。 辣椒素是辣椒中的主要辛辣成分,可以通過(guò)激活感覺(jué)神經(jīng)從而將傷害性刺激信息傳導(dǎo)至中樞,其受體--辣椒素受體(vanilloid receptor，VR1)在疼痛傳導(dǎo)過(guò)程中也具有相當(dāng)重要的作用，它可被多種傷害性刺激(辣椒素、

3、H+和傷害性熱刺激)所激活，而且該受體通道與電壓門控性鈉通道一樣主要存在于初級(jí)感覺(jué)神經(jīng)元上。龍血素B是否能夠通過(guò)影響辣椒素受體通道而成為干預(yù)痛覺(jué)信息傳入的的另一種原因呢，兩種調(diào)制作用之間是否存在著內(nèi)在聯(lián)系也有待深入探討。 本文運(yùn)用不同的方法和途徑研究中藥血竭的鎮(zhèn)痛機(jī)理，確定其成分龍血素B干預(yù)痛覺(jué)中樞信息傳入的具體藥理效應(yīng)，為中藥血竭的鎮(zhèn)痛藥理研究提供了新的思路和方法。首先應(yīng)用全細(xì)胞膜片鉗實(shí)驗(yàn)技術(shù)觀察了龍血素B對(duì)大鼠背根神經(jīng)節(jié)細(xì)胞

4、辣椒素誘發(fā)電流的反應(yīng)，對(duì)辣椒素所引起的細(xì)胞膜去極化電位的影響以及對(duì)受體通道翻轉(zhuǎn)電位的作用，再采用Alexander I.Sobolevsky所提出受體與配體結(jié)合模型擬合膜片鉗實(shí)驗(yàn)所得數(shù)據(jù)，估計(jì)龍血素B作用前后大鼠背根神經(jīng)節(jié)細(xì)胞辣椒素誘發(fā)電流的參數(shù)。結(jié)果顯示，辣椒素受體拮抗劑辣椒卓平可以完全抑制辣椒素受體電流；龍血素B對(duì)辣椒素受體電流以及辣椒素所引發(fā)的細(xì)胞去極化電位具有濃度依賴性抑制作用；低濃度的龍血素B對(duì)電流和去極化膜電位幾乎沒(méi)有影響，

5、而高濃度的龍血素B幾乎完全抑制了受體電流和去極化膜電位；此外發(fā)現(xiàn)龍血素B對(duì)辣椒素受體通道的翻轉(zhuǎn)電位幾乎沒(méi)有影響；由擬合結(jié)果顯示龍血素B與辣椒素受體的相互作用符合簡(jiǎn)單的一個(gè)配體和一個(gè)受體位點(diǎn)相結(jié)合的作用模式。 上述研究結(jié)果說(shuō)明龍血素B除了能夠通過(guò)調(diào)制初級(jí)感覺(jué)神經(jīng)元背根神經(jīng)節(jié)細(xì)胞電壓門控性鈉通道，干預(yù)外周痛覺(jué)信息的中樞傳入產(chǎn)生鎮(zhèn)痛作用之外。還可能通過(guò)影響初級(jí)感覺(jué)神經(jīng)元上的辣椒素受體通道而影響痛覺(jué)信息的傳遞。這也是血竭產(chǎn)生鎮(zhèn)痛作用的另

6、一種可能的藥理機(jī)制。此外，通過(guò)受體配體結(jié)合模型模擬結(jié)果發(fā)現(xiàn)龍血素B在辣椒素受體通道中僅有一個(gè)結(jié)合位點(diǎn)，龍血素B正是與其相結(jié)合而阻斷鈣離子等離子的內(nèi)流從而抑制辣椒素所誘發(fā)電流的產(chǎn)生。因此龍血素B可能是通過(guò)影響初級(jí)感覺(jué)神經(jīng)元背根神經(jīng)節(jié)細(xì)胞電壓門控性鈉通道以及辣椒素受體通道的雙重作用而阻斷痛覺(jué)信息的傳入的。 在以前研究的基礎(chǔ)上，本研究闡明了龍血素B對(duì)電壓門控性鈉通道以及辣椒素受體通道的雙重作用從而影響痛覺(jué)信息的傳遞，導(dǎo)致血竭產(chǎn)生鎮(zhèn)痛作