內(nèi)源性LPS對奶牛瘤胃與盲腸的炎性損傷機理.pdf

1、由于現(xiàn)階段我國牧草資源缺乏，粗飼料品質(zhì)低下，高精料比低精料的日糧模式被逐漸廣泛采用。雖然高精料日糧可以滿足奶牛高泌乳狀態(tài)時能量和營養(yǎng)的需求，但是它也會導致瘤胃pH下降而產(chǎn)生亞急性瘤胃酸中毒。同時，高精料日糧的模式也擾亂瘤胃微生物穩(wěn)定的狀態(tài)，瘤胃內(nèi)大量的革蘭氏陰性菌裂解釋放出細菌內(nèi)毒素(LPS)，引發(fā)瘤胃液和糞中（尤其是盲腸內(nèi)容物中）的LPS含量升高。高濃度的LPS可通過消化道吸收進入血液，血液中LPS含量增加，導致機體全身性炎癥反應(yīng)綜合

2、征，從各個方面影響奶牛生產(chǎn)性能和奶牛場經(jīng)濟效益。本研究主要針對現(xiàn)階段我國規(guī)?；膛ｐB(yǎng)殖中日糧精粗比普遍偏高的現(xiàn)況，來研究產(chǎn)生的內(nèi)源性LPS對奶牛瘤胃和盲腸的炎性損傷機理。
　　試驗一:瘤胃液與盲腸內(nèi)容物中LPS含量的測定:我國大部分牧場為了保持奶牛高泌乳狀態(tài)普遍使用高精料日糧模式，然而，這種模式極易產(chǎn)生亞急性瘤胃酸中毒，從而引起內(nèi)源性LPS的大量產(chǎn)生。本試驗主要研究兩種日糧模式下，高精料/低精料6∶4和高精料/低精料4∶6情況下對

3、6頭奶牛引起亞急性瘤胃酸中毒，致使機體產(chǎn)生內(nèi)源性LPS，飼喂6個月后，屠宰試驗動物，采集瘤胃液、盲腸內(nèi)容物，利用鱟試劑盒測定瘤胃液和盲腸內(nèi)容物中LPS含量。結(jié)果表明，盲腸內(nèi)容物中的LPS含量均高于瘤胃液中LPS含量;瘤胃液中LPS含量高精料組高于低精料組，差異顯著(P＜0.05);盲腸內(nèi)容物中LPS含量高精料組高于低精料組，差異極顯著(P＜0.01)。
　　試驗二:內(nèi)源性LPS對瘤胃乳頭、瘤胃壁與盲腸壁組織病理學影響:為了探討內(nèi)源

4、性LPS對奶牛瘤胃乳頭、瘤胃壁以及盲腸壁組織形態(tài)學的影響，試驗選擇6頭荷斯坦奶牛，隨機分為2組，每組3頭，分別飼喂精粗比為6∶4和精粗比為4∶6的日糧飼料，并且6頭奶牛都安裝永久性瘤胃瘺管。試驗期為6個月。飼喂試驗進行過程中，經(jīng)瘤胃瘺管進行活體采集瘤胃乳頭，將采集的瘤胃乳頭進行切片，后經(jīng)HE染色，飼喂試驗結(jié)束后屠宰6頭奶牛，分別采取瘤胃壁、盲腸壁樣品，切片后經(jīng)HE染色，對日糧精粗比不同的兩組奶牛的瘤胃乳頭、瘤胃壁和盲腸壁進行組織形態(tài)學觀

5、察。結(jié)果顯示，內(nèi)源性LPS含量的多少，使得瘤胃乳頭和瘤胃壁黏膜層出現(xiàn)不同程度炎性損傷，內(nèi)源性LPS含量高的試驗?zāi)膛Ａ鑫溉轭^和瘤胃壁黏膜層厚度變薄，角質(zhì)層出現(xiàn)脫落現(xiàn)象。內(nèi)源性LPS在百腸中含量較高，對盲腸壁的炎性損傷也較嚴重，盲腸壁的完整性遭到破壞，盲腸壁黏膜上皮和大腸腺也出現(xiàn)損傷。
　　試驗三:內(nèi)源性LPS對瘤胃乳頭、瘤胃壁、盲腸壁相關(guān)炎性損傷基因表達的影響:為了探討不同類型飼料日糧產(chǎn)生的內(nèi)源性LPS對奶牛瘤胃乳頭、瘤胃壁以及盲腸

6、壁的影響，試驗選擇6頭荷斯坦奶牛，隨機分為2組，每組3頭，分別飼喂精粗比為6∶4和精粗比為4∶6的日糧飼料，并且6頭奶牛都安裝永久性瘤胃瘺管。試驗期為6個月。飼喂試驗進行過程中經(jīng)瘤胃瘺管進行活體采集瘤胃乳頭，液氮處理后保存于-70℃，飼喂試驗結(jié)束后屠宰6頭奶牛，分別采取瘤胃壁、盲腸壁樣品，液氮處理后保存于-70℃。針對對瘤胃液和盲腸內(nèi)容物中LPS含量不同的兩組奶牛的瘤胃乳頭、瘤胃壁和盲腸壁，利用實時熒光PCR技術(shù)測定炎性損傷機制中關(guān)鍵因