1,25(OH)2D3對(duì)系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者T淋巴細(xì)胞亞群的免疫調(diào)節(jié)作用及臨床意義.pdf

1、目的:探討1,25(OH)2D3對(duì)系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）患者 T淋巴細(xì)胞亞群的免疫調(diào)節(jié)作用。
　　方法:1.所有人均為我院風(fēng)濕免疫科2013年4月到2013年11月的門診和住院患者；實(shí)驗(yàn)組來(lái)自我院住院確診SLE患者共24例，診斷依據(jù)1997年美國(guó)風(fēng)濕病學(xué)會(huì)（ACR）修訂的S LE分類診斷標(biāo)準(zhǔn)；疾病對(duì)照組來(lái)自我院確診類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（RA）患者共12例，RA組均符合2009年ACR和歐洲抗風(fēng)濕病聯(lián)盟（EULAR）分類標(biāo)準(zhǔn)；健康對(duì)照組1

2、3例；根據(jù)SLE疾病活動(dòng)性指數(shù)(SLEDAI)評(píng)分SLEDAl≥10分表示疾病活動(dòng)。2.采用密度梯度離心法分離三組外周血單個(gè)核細(xì)胞（PBMC），采用磁珠正選法分離T淋巴細(xì)胞，流式細(xì)胞術(shù)鑒定T淋巴細(xì)胞純度大于96％，以1×109/L種植于24孔板（1.0ml/孔）。（1）分別在實(shí)驗(yàn)組、疾病對(duì)照組和健康對(duì)照組的 RMPI-1640體系中加入1,25(OH)2D3，同時(shí)設(shè)立空白對(duì)照組，孵育48小時(shí)后，bioplex法檢測(cè)上清液中IL-1β、T

3、NF-α、IFN-γ、IL-4、IL-23水平。（2）RPMI-1640體系中加入佛波酯(PMA)/離子霉素(Ionomycin)以建立 Th17細(xì)胞培養(yǎng)體系，加入1,25(OH)2D3，并設(shè)立空白對(duì)照組，48小時(shí)后檢測(cè)上清液中IL-17水平。
　　結(jié)果:（1）SLE患者T淋巴細(xì)胞經(jīng)維生素D3體外干預(yù)48小時(shí)后的細(xì)胞上清液IL-4明顯高于自身對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），IL-23、IFN-γ、IL-17水平顯著低于自

4、身對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），TNF-α水平低于自身對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。（2）RA患者T淋巴細(xì)胞經(jīng)維生素D3干預(yù)后的細(xì)胞上清液IL-4明顯高于自身對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），IL-23、IFN-γ、TNF-α、IL-17、IL-1β水平顯著低于自身對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。（3）在活性維生素D3干預(yù)下，SLE患者外周血T淋巴細(xì)胞分泌的IL-4水平高于健康對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)

5、學(xué)意義（P＜0.01），分泌的IFN-γ、TNF-α、IL-23水平高于健康對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），IL-17水平高于健康組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。（4）在活性維生素D3干預(yù)下，RA患者外周血T淋巴細(xì)胞分泌的IL-4水平明顯高于健康對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），分泌的IL-23水平明顯高于健康對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），TNF-α、IL-17水平高于健康組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0

6、.05）。（5）活性維生素D3干預(yù)后，SLE組干預(yù)后與干預(yù)前的IL-4差值明顯高于RA組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）.
　　結(jié)論:1、活性維生素D3抑制SLE患者外周血Th1（IFN-γ）和Th17（IL-17）相關(guān)細(xì)胞因子的表達(dá)，促進(jìn)Th2相關(guān)細(xì)胞因子（IL-4）的表達(dá)，推斷活性維生素D3可能對(duì)SLE患者T淋巴細(xì)胞亞群有免疫調(diào)節(jié)作用，對(duì)Th1/Th2/Th17細(xì)胞調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)平衡有調(diào)控作用。2、活性維生素D3對(duì)SLE患者外周血