間充質(zhì)干細胞對系統(tǒng)性紅斑狼瘡的免疫調(diào)節(jié)作用.pdf

1、目的：探討體外人間充質(zhì)干細胞(HMSCs)對系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)的免疫調(diào)節(jié)作用和小鼠間充質(zhì)干細胞(mMSCs)聯(lián)合來氟米特(LEF)對小鼠T淋巴細胞的免疫調(diào)節(jié)作用。 方法：分別從BAIJB/c小鼠骨髓和健康人骨髓中分離培養(yǎng)MSCs。(1)用EZ-SepTMMouse 1X分離異體BALB/c小鼠的脾淋巴細胞，在ConA誘導(dǎo)的同時，先經(jīng)LEF處理，洗去LEF后，脾淋巴細胞再和mMSCs共同培養(yǎng)。分組：A組：脾淋巴細胞；B組：脾

2、淋巴細胞+mMSCs；C組：LEF處理的脾淋巴細胞；D組：LEF處理的脾淋巴細胞+mMSCs。用MTT比色法檢測各組T淋巴細胞的增殖情況，流式細胞術(shù)分析各組T淋巴細胞的活化及凋亡情況，定量RT-PCR檢測各組T淋巴細胞的IL-2、IL-10 mRNA水平。(2)在PHA刺激下，SLE患者外周血淋巴細胞與不同數(shù)量的HMSCs共同培養(yǎng)。檢測各組T淋巴細胞的增殖、凋亡情況，分析各組T淋巴細胞的IFN-γ,、IL-10、TGF-β1 mRNA水

3、平。(3)分離SLE患者外周血單核細胞，在含rhGM-CSF和rhIL-4的培養(yǎng)條件下制備樹突狀細胞(DC)。分組：HMSCs處理組、HMSCs未處理組。用流式細胞儀檢測各組DC表面CD86、CD83、CDla和HLA-DR的表達，MTT法檢測各組DC刺激淋巴細胞增殖的能力。 結(jié)果：(1)在體外，mMSCs聯(lián)合LEF對小鼠T淋巴細胞的增殖、IL-10mRNA的表達有協(xié)同抑制作用。(2)HMSCs對由PHA誘導(dǎo)的SLE患者T淋巴細

4、胞的增殖、凋亡均有抑制作用，且抑制作用與HMSCs呈劑量依賴性。HMSCs能促進SLE患者T淋巴細胞TGF-β1 mRNA的表達，抑制IL-10、IFN-γ mRNA的表達。(3)HMSCs可以影響SLE患者單核細胞來源的DC分化、成熟、具有抑制DC刺激異體淋巴細胞增殖的能力。 結(jié)論：(1)mMSCs聯(lián)合LEF對小鼠T淋巴細胞有一定程度的協(xié)同免疫調(diào)節(jié)作用；(2)}HMSCs可能通過抑制SLE患者T淋巴細胞增殖、減少T淋巴細胞凋亡