2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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1、背景:大腸癌是常見的消化道惡性腫瘤之一,嚴重威脅著人類生命健康。由于大腸癌起病隱匿,早期多無明顯癥狀,一旦出現(xiàn)癥狀,大多已是中晚期。大腸癌患者的生存率直接與診斷時的疾病的進展程度有關。當大腸癌患者癌灶局限于腸壁時(A期或B期),五年生存率>75%,當出現(xiàn)淋巴結轉移時,患者的五年生存率則降至30%-60%。因此,對大腸癌早期有效的篩查診斷,能夠大大的提高患者的生存率,降低病死率。目前最常用的篩查方法是糞便潛血實驗,但其特異性低、且易受到食

2、物的影響。研究認為,大腸癌的發(fā)生發(fā)展是一個受多基因、多階段、多步驟調控的復雜過程,此過程常與細胞增殖、凋亡失控有關,涉及癌基因激活、抑癌基因失活、錯配修復基因以及一些修飾基因的改變。某種基因的改變只是在大腸癌發(fā)生的某一階段以高頻率出現(xiàn),從而導致大腸癌的發(fā)生。其中涉及與大腸癌有關的有APC、MMR、DCC、P53抑癌基因和K-ras、C-myc原癌基因的突變。APC基因是家族性腺瘤樣息肉病(familial adenomatous pol

3、yposis,F(xiàn)AP)的易感基因,是大腸腫瘤發(fā)生的早期分子事件,但穩(wěn)定于腫瘤發(fā)生發(fā)展的全過程。近年研究表明,APC基因在85%的結腸癌中缺失或失活,并且該基因的缺失與結腸癌的遺傳易感性密切相關。已有研究表明,糞便與組織中APC基因聯(lián)合檢測對大腸癌高危人群的篩查診斷具有較高的特異性,并且減少行內窺鏡檢查的痛苦。本課題運用蛋白截短檢測技術(PTT),檢測散發(fā)性大腸癌患者的癌組織及糞便脫落細胞APC基因的突變,探索糞便基因檢測代替組織基因檢測

4、的可行性。
  目的:利用蛋白截短檢測技術(PTT)聯(lián)合檢測散發(fā)性大腸癌患者糞便及癌組織中APC基因的突變,探討其在大腸癌篩查中的作用及建立無創(chuàng)性篩查大腸癌方法的可行性,從而探索大腸癌早期診斷既經濟有效又快捷的篩查方法。
  方法:(1)收集寧夏醫(yī)科大學總醫(yī)院2011年10月-2012年10月期間,50例行腸鏡活檢診斷為大腸癌的患者,并經手術切除病理學明確診斷為散發(fā)性大腸癌患者的糞便3-5g(術前收集),少量癌組織(大于1

5、g);30例經胃腸鏡及其他影像學、實驗、物理學檢查確診為正常人群的糞便3-5g,少量腸粘膜組織(大于1 g)。以上標本均在-80℃保存,共計80例,擴增目的DNA。(2)運用蛋白截短檢測技術(PTT),對50例散發(fā)性大腸癌患者的癌組織和糞便脫落細胞及30例正常人群的腸粘膜組織和糞便脫落細胞中APC基因第15外顯子進行截短型突變檢測,并兩兩進行對比,比較正常人群與大腸癌患者糞便及癌組織APC基因突變的情況。(3)對檢測出有突變基因的糞便及

6、組織進行統(tǒng)計學分析,探討散發(fā)性大腸癌患者的糞便與癌組織中APC基因第15外顯子突變的陽性率有無差異。
  結果:(1)用組織提取的DNA為模板,擴增目的基因成功率100%(50/50),用糞便提取的DNA為模板,擴增目的基因成功率86%(43/50)。(2)應用熒光標記的數(shù)字化PTT技術對50例大腸癌組織標本的APC基因第15外顯子進行截短型突變檢測,共檢出17例截短型突變(其中引物15A檢出4例突變,引物15B檢出7例突變,引物

7、15C檢出2例突變,引物15 D檢出4例突變),突變率為34%;對50例糞便標本的APC基因第15外顯子進行截短型突變檢測,共檢出14例截短型突變(其中引物15A檢出2例突變,引物15B檢出6例突變,引物15C檢出2例突變,引物15D檢出4例),突變率為32.6%。其中有13例癌組織及對應的糞便均陽性。(3)30例正常人群的大腸粘膜組織及糞便脫落細胞中APC基因第15外顯子進行截短型突變檢測均未檢測出有突變。(4)散發(fā)性大腸癌患者癌組織

8、與糞便脫落細胞APC基因第15外顯子截短型突變率相比差異無統(tǒng)計學意義(χ2檢驗P>0.05)。Kappa值為0.749,大腸癌患者的癌組織中APC基因及糞便脫落細胞APC基因檢測的一致性較好。
  結論:(1)糞便中檢測APC基因突變在大腸癌的早期篩查中具有可行性。(2)大腸癌患者的癌組織檢測APC基因與糞便脫落細胞檢測 APC基因的一致性較好,為糞便替代癌組織進行APC基因檢測提供了可行性的依據(jù)。(3)蛋白截短檢測技術(PTT)

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