大腸癌線(xiàn)粒體DNA突變的檢測(cè)與分析.pdf

1、第一軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文大腸癌線(xiàn)粒體DNA突變的檢測(cè)與分析姓名：閻麗申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專(zhuān)業(yè)：內(nèi)科學(xué)（消化系?。┲笇?dǎo)教師：肖冰20050510幸史攘要戳探謠mtDNA突變奩大髓癌笈瘸橇鍘滓|的造靛及作臻，并有鬻為將來(lái)暈期診凝大腸癌提供有效的新的標(biāo)志物，以能率期發(fā)現(xiàn)大腸癌，便患者翠期接受手術(shù)治療，以提搿5辭擻存率。方法：1、通過(guò)PCR技零擴(kuò)增魍株大臌癌細(xì)腿橡SW620、SW480、HT29、LOVO署H一鍘蹶代培莠越燕常腸上皮纓腿株的線(xiàn)粒體

2、DNAD環(huán)區(qū)的基阻，成功擴(kuò)增后，將PCR產(chǎn)物縫健，然惹邂過(guò)ABl377測(cè)膨投袋嗣雙駁甄牲毽熒必法全爨麓測(cè)讀序列，著與線(xiàn)靛镕基因霹數(shù)攝對(duì)照(麴罄級(jí)塑魎ncbi。nlmnih。gov／BLAST／)，對(duì)比分析網(wǎng)株大腸癌細(xì)胞系和一例原代培養(yǎng)的正常腸上夜緇藤靜線(xiàn)粒體DNAD繇醞的突變位點(diǎn)。、2、提取40例大腸瘸組織和癌旁正常綴織的線(xiàn)粒體DNA，橫獬線(xiàn)被體DNAD。秘：區(qū)基因全長(zhǎng)設(shè)計(jì)露黠孳|物，然器用PCR鼓零分鼷擴(kuò)增線(xiàn)糕髂DNAD垮聯(lián)的基因，成

3、功擴(kuò)增艨，每段線(xiàn)粒體DNAD，環(huán)隧的基因在200300bp左右，采廂鍛染SSCP技術(shù)遂行梭測(cè)，郁每鍘瘸組織與癌努正常綴級(jí)浚行辯魄分櫥，麴密臻辯常泳動(dòng)的奄溶辮認(rèn)為楚患突變。3、提取20鍘大腸癭爨卷彝6鍘正鬻人辨羼覷囟紉臌的線(xiàn)載體DNA，橫搖躐粒體DNAD環(huán)送基函全長(zhǎng)設(shè)計(jì)弓l物，熬爝霜PCR技術(shù)分爨穢爆大腸癌怒者鞠蓬常入的外周盎臼緬脆的線(xiàn)粒體DNAD一舔囂豹蒸疆，成秘?cái)U(kuò)增囂蠹按溺序撿溺煮突變。結(jié)聚：1、滔株大赫癀緇穩(wěn)椽釉一鑲燕鬻瑟上瘦纓髓株