大腸癌線粒體DNA突變的檢測與分析.pdf_第1頁
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1、第一軍醫(yī)大學碩士學位論文大腸癌線粒體DNA突變的檢測與分析姓名:閻麗申請學位級別:碩士專業(yè):內(nèi)科學(消化系?。┲笇Ы處煟盒け?0050510幸史攘要戳探謠mtDNA突變奩大髓癌笈瘸橇鍘滓|的造靛及作臻,并有鬻為將來暈期診凝大腸癌提供有效的新的標志物,以能率期發(fā)現(xiàn)大腸癌,便患者翠期接受手術治療,以提搿5辭擻存率。方法:1、通過PCR技零擴增魍株大臌癌細腿橡SW620、SW480、HT29、LOVO署H一鍘蹶代培莠越燕常腸上皮纓腿株的線粒體

2、DNAD環(huán)區(qū)的基阻,成功擴增后,將PCR產(chǎn)物縫健,然惹邂過ABl377測膨投袋嗣雙駁甄牲毽熒必法全爨麓測讀序列,著與線靛镕基因霹數(shù)攝對照(麴罄級塑魎ncbi。nlmnih。gov/BLAST/),對比分析網(wǎng)株大腸癌細胞系和一例原代培養(yǎng)的正常腸上夜緇藤靜線粒體DNAD繇醞的突變位點。、2、提取40例大腸瘸組織和癌旁正常綴織的線粒體DNA,橫獬線被體DNAD。秘:區(qū)基因全長設計露黠孳|物,然器用PCR鼓零分鼷擴增線糕髂DNAD垮聯(lián)的基因,成

3、功擴增艨,每段線粒體DNAD,環(huán)隧的基因在200300bp左右,采廂鍛染SSCP技術遂行梭測,郁每鍘瘸組織與癌努正常綴級浚行辯魄分櫥,麴密臻辯常泳動的奄溶辮認為楚患突變。3、提取20鍘大腸癭爨卷彝6鍘正鬻人辨羼覷囟紉臌的線載體DNA,橫搖躐粒體DNAD環(huán)送基函全長設計弓l物,熬爝霜PCR技術分爨穢爆大腸癌怒者鞠蓬常入的外周盎臼緬脆的線粒體DNAD一舔囂豹蒸疆,成秘擴增囂蠹按溺序撿溺煮突變。結聚:1、滔株大赫癀緇穩(wěn)椽釉一鑲燕鬻瑟上瘦纓髓株

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