大黃素對(duì)大鼠肝內(nèi)膽汁淤積相關(guān)轉(zhuǎn)運(yùn)體基因表達(dá)的研究.pdf

1、目的:探討大黃素對(duì)a-萘異硫氰酸酯(ANIT)致急性肝內(nèi)膽汁淤積的保護(hù)作用。
　　 背景:膽汁淤積是正常的膽汁流被損害或阻斷,膽汁酸和其他有害物質(zhì)在肝臟中過(guò)度蓄積而引發(fā)的肝損傷。它是多種疾病的組成部分,如:膽石癥、妊娠肝內(nèi)膽汁淤積癥、原發(fā)性膽汁性肝硬變和原發(fā)性硬化性膽管炎等。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)定位于肝細(xì)胞膜竇面和微膽管面上的轉(zhuǎn)運(yùn)體對(duì)維持正常的膽汁流和肝臟功能起著重要作用。
　　 大黃素即1,3,8-羥基-6-甲基葸醌,是從已

2、廣泛用于臨床治療淤膽型肝炎的傳統(tǒng)中藥大黃根莖提純的一種葸醌類(lèi)衍生物,具有廣泛的藥理學(xué)作用,如:抗炎、抗病毒、抑菌、免疫調(diào)節(jié)和肝保護(hù)等。推測(cè)大黃素能緩解膽汁淤積可能與調(diào)節(jié)肝細(xì)胞膜上轉(zhuǎn)運(yùn)體基因的表達(dá)有關(guān)。
　　 方法:采用ANIT灌胃制備大鼠急性肝內(nèi)膽汁淤積病理模型。將32只大鼠隨機(jī)平均分為正常組、正常+大黃素組、模型組和模型+大黃素組。造模前,模型+大黃素和正常+大黃素組給予大黃素40mg/kg/d灌胃,正常組及模型組給予羧甲基纖

3、維素鈉處理,均持續(xù)到處死動(dòng)物之前,于實(shí)驗(yàn)第5天給藥后4小時(shí),模型組和模型+大黃素組100mg/kg ANIT灌胃1次建立模型,其余兩組予以橄欖油對(duì)照處理,建模后48小時(shí)處死動(dòng)物,收集標(biāo)本。觀察各組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物肝功能各項(xiàng)生化指標(biāo)TBiL,DBiL,ALT,AST,ALP和TBA的變化和肝臟組織病理學(xué)改變。
　　 結(jié)果:(1)模型組與正常組比較,TBiL,DBiL,ALT,AST,ALP和TBA濃度明顯增高(P＜0.01)；光鏡下可見(jiàn)肝

4、細(xì)胞變性和壞死、中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)。(2)模型+大黃素組與模型組比較,TBiL,DBiL,ALT,AST,ALP和TBA均降低(P＜0.01或P＜0.05)；組織病理學(xué)改變輕微。(3)正常+大黃素組與正常組比較上述各指標(biāo)均無(wú)顯著變化(P＞0.05)。
　　 結(jié)論:大黃素能明顯降低膽汁淤積大鼠血清中TBiL,DBiL,ALT,AST,ALP和TBA濃度,顯著降低膽汁酸的毒性作用,抑制肝損傷。
　　 目的:探討大黃素治療大鼠急性

5、肝內(nèi)膽汁淤積的作用機(jī)制。
　　 方法:采用ANIT灌胃制備大鼠急性肝內(nèi)膽汁淤積病理模型,將32只大鼠隨機(jī)分為正常組、正常+大黃素組、模型組和模型+大黃素組,采用實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR檢測(cè)肝細(xì)胞膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因膽鹽輸出泵(BSEP)、多藥耐藥相關(guān)蛋白2(MRP2)、鈉-牛磺膽酸共轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(NTCP)、多藥耐藥蛋白2(MDR2)、多藥耐藥蛋白la(Mdrla)、多藥耐藥蛋白lb(Mdlrb)、多藥耐藥相關(guān)蛋白3(MRP3)和核受體法

6、尼酯衍生物X受體(FXR)mRNA水平的表達(dá),Western blot方法檢測(cè)肝臟P-糖蛋白(P-gp)的變化。
　　 結(jié)果:(1)模型組與正常組比較,在mRNA水平NTCP和FXR表達(dá)降低(P＜0.01),MDR2,Mdrlb和MRP3表達(dá)增高(P＜0.01或P＜0.05),BSEP,Mdrla和MRP2表達(dá)無(wú)顯著差異(P＞0.05);在蛋白水平P-gp表達(dá)增高(P＜0.05)。(2)模型+大黃素組與模型組比較,NTCP,MD

7、R2,Mdrla,Mdrlb和MRP3 mRNA水平表達(dá)高于模型組(P＜0.01或P＜0.05),但BSEP,MRP2和FXR的表達(dá)無(wú)顯著差異(P＞0.05)；P-gP表達(dá)同時(shí)也高于模型組(P＜0.05)。(3)正常+大黃素組與正常組比較上述各指標(biāo)均無(wú)顯著變化(P＞0.05)。
　　 結(jié)論:大黃素通過(guò)上調(diào)肝臟中與膽汁酸代謝相關(guān)的轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白MRP3和P-gp的表達(dá)以減少膽汁酸及其他有毒化合物在肝臟中的蓄積可能為其退黃、恢復(fù)肝臟功能的