清膽補腎湯對肝內(nèi)膽汁淤積孕鼠的實驗研究.pdf

1、目的：本實驗運用以清熱利濕、滋陰補腎為立法的清膽補腎湯研究對肝內(nèi)膽汁淤積孕鼠血清影響、肝臟病理結(jié)構(gòu)變化及肝臟ICAM-1mRNA在不同部位的表達的影響。 方法：動物及分組：成年Wister雌性大鼠60只，清潔級，體重200-250g，適應性飼養(yǎng)3天后，與雄性大鼠2：1合籠，每日觀察陰栓脫落，陰栓脫落日定為妊娠第1日，一直飼養(yǎng)到妊娠第12日待用。60只孕鼠隨機分為6組(每組10只)，空白對照組、模型對照組、清膽補腎方高劑量組、清膽

2、補腎湯中劑量組、清膽補腎湯低劑量組、西藥組。造模及給藥方法：除空白對照組肌肉注射生理鹽水(2.5mg/kg-1·d-1)外，其余各組于妊娠第12日起肌肉注射EE，劑量為2.5mg/kg-1·d-1(EE溶于丙二醇中)，連續(xù)5天，清膽補腎湯高、中、低劑量組及西藥組于妊娠第17日給予100％、50％、25％清膽補腎湯，地塞米松按0.1mg/100g體重皮下注射，每只1次，1日1次。取材及檢測方法：分娩第1天眶靜脈采全血3ml，室溫下自凝20

3、min后，離心沉淀10min，離心速度為3000r/min，操作按試劑盒說明進行。由湖北省中醫(yī)院檢驗科完成。斷頭法處死大鼠，分離肝膽管，灌流，處理肝組織，離心，震蕩，加入ICAM-1熒光抗體；取出肝臟組織置于10％甲醛內(nèi)，固定24h以上，56℃石蠟包埋，HE染色，觀察光鏡下肝臟組織學改變。統(tǒng)計方法：均t檢驗。 結(jié)果： 1模型對照組孕鼠血清ALT、AST、ALP、TBIL、TBA均明顯高于正常對照組(p＜0.01)，清膽補

4、腎湯高、中劑量組與空白對照組血清各項指標均無差異(p＞0.05)，空白對照組與清膽補腎湯低劑量組除DBIL外(p＞0.05)各項指標均有顯著性差異(p＜0.01，p＜0.05)，模型對照組與清膽補腎湯高、中、低劑量組除TBIL、DBIL外各項指標均有顯著性差異(p＜0.01)，西藥組與清膽補腎湯中劑量組除ALT外(p＜0.05)，清膽補腎湯中劑量組血清AST、ALT值明顯低于西藥組(p＜0.01)，其余各項指標均無差異(p＞0.05)。

5、 2空白對照組肝臟無明顯形態(tài)改變，模型對照組孕鼠肝臟病理結(jié)構(gòu)發(fā)現(xiàn)部分毛細血管內(nèi)有膽栓形成，清膽補腎湯高、中劑量組孕鼠肝臟病理結(jié)構(gòu)肝小葉結(jié)構(gòu)完整，未見膽汁樣物質(zhì)沉積，清膽補腎湯低劑量組及西藥組肝臟病理結(jié)構(gòu)見肝竇附近少許肝細胞水腫，未見膽汁樣物質(zhì)沉積。 3ICAM-1在模型對照組肝細胞、膽管內(nèi)皮細胞、門靜脈內(nèi)皮細胞上的表達明顯高于空白對照組及清膽補腎湯中劑量組(P＜0.01)；ICAM-1在空白對照組肝細胞、膽管內(nèi)皮細胞、門

6、靜脈內(nèi)皮細胞上的表達與清膽補腎湯中劑量組及西藥組有明顯差異(P＜0.01)；)ICAM-1在西藥對照組肝細胞、門靜脈內(nèi)皮細胞上的表達與清膽補腎湯中劑量組有明顯差異(P＜0.01)，在膽管內(nèi)皮細胞上的表達與清膽補腎湯中劑量組無差異(P＞0.05)。 結(jié)論：為了探討清膽補腎湯治療妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥的可能作用機制，我們設計了本課題以探討清膽補腎湯對肝內(nèi)膽汁淤積孕鼠肝臟血清、病理結(jié)構(gòu)及ICAM-1的表達的影響，以為其臨床提供堅實的理論