肉雞組織中氟喹諾酮類抗生素快速檢測(cè)的膠體金技術(shù)研究.pdf

1、目前，氟喹諾酮類藥物殘留的檢測(cè)方法需要嚴(yán)格的實(shí)驗(yàn)室環(huán)境、較高的硬件配置、高素質(zhì)的操作人員、檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng)、成本高，不適用于大量樣品的篩選，也難在基層檢測(cè)單位以及食品企業(yè)推廣使用。本研究選擇具有氟喹諾酮類藥物母核結(jié)構(gòu)共性特征的環(huán)丙沙星(CPFX)為半抗原，將單克隆抗體技術(shù)、膠體金免疫層析技術(shù)引入到氟喹諾酮類藥物殘留檢測(cè)方法的研究之中，建立了一種操作簡(jiǎn)單、檢測(cè)快速、敏感性高、特異性和廣譜性強(qiáng)的氟喹諾酮類藥物殘留免疫學(xué)檢測(cè)方法，為臨床氟喹諾酮類抗

2、生素殘留的快速檢測(cè)和大量樣品的篩選，動(dòng)物性食品生產(chǎn)過程控制、企業(yè)自檢等提供了一種簡(jiǎn)單、快速、靈敏、方便、可靠的現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)技術(shù)。并對(duì)河北及周邊地區(qū)肉雞樣品進(jìn)行了氟喹諾酮類藥物殘留的檢測(cè)與分析，掌握了河北及周邊地區(qū)肉雞樣品中氟喹諾酮類藥物殘留現(xiàn)狀，為氟喹諾酮類抗生素殘留的監(jiān)控檢測(cè)提供技術(shù)支持。
　　將具有氟喹諾酮類藥物母核結(jié)構(gòu)共性特征的環(huán)丙沙星(CPFX)與載體蛋白(BSA)偶聯(lián)，制備人工抗原CPFX-BSA，免疫6周齡BALB/c雌性

3、小鼠，篩選得到廣譜性、敏感性最好4H8單克隆抗體，將4H8單克隆抗體純化后標(biāo)記膠體金顆粒作為金標(biāo)墊，分別以CPFX-BSA偶聯(lián)蛋白和兔抗鼠IgG作為檢測(cè)線和質(zhì)控線，組裝了檢測(cè)氟喹諾酮類抗生素殘留的膠體金免疫層析試紙條。該試紙條肉眼于10min內(nèi)即可判定結(jié)果，用于檢測(cè)10種氟喹諾酮類抗生素均顯示為陽性，而檢測(cè)4種其它常見藥物均顯示為陰性，表明該試紙條對(duì)10種氟喹諾酮類抗生素均有較好的檢測(cè)特異性。對(duì)環(huán)丙沙星、培氟沙星、達(dá)氟沙星、氧氟沙星、諾

4、氟沙星、恩諾沙星、洛美沙星的檢測(cè)限為3.2μg/kg，對(duì)沙拉沙星、雙氟沙星、麻保沙星的檢測(cè)限為6.4μg/kg。穩(wěn)定性試驗(yàn)表明在37℃條件下試紙條可穩(wěn)定保存60d，在4℃條件下可穩(wěn)定保存360d。采用本研究研制的試紙條檢測(cè)河北省及周邊地區(qū)的雞肉樣品3414份，平均陽性檢出率為0.76％，其中屠宰場(chǎng)、超市、活禽市場(chǎng)的平均陽性檢出率分別為0.38％、0.09％、2.19％，檢測(cè)結(jié)果與ELIAS法比對(duì)一致。表明本研究研制的膠體金免疫層析試紙條