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文檔簡(jiǎn)介
1、本文通過采用人肝正常細(xì)胞(HL-7702)的體外實(shí)驗(yàn)來(lái)探討表沒食子兒茶素沒食子酸酯(Epigallocatechin Gallate,EGCG)對(duì)鎘(Cd)誘導(dǎo)肝細(xì)胞損傷的保護(hù)作用及其機(jī)制。研究采用MTT比色法檢測(cè)鎘的細(xì)胞毒性及EGCG對(duì)細(xì)胞活力的影響;Hoechst33258染色實(shí)驗(yàn)和瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)細(xì)胞凋亡水平;紫外-可見全波段掃描檢測(cè)(UV-Vis)及核磁共振(NMR)譜分析EGCG與鎘離子之間的化學(xué)反應(yīng);DCFH-DA染色后通
2、過熒光分光光度儀檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)活性氧自由基(ROS)水平。研究結(jié)果如下:
1.鎘處理后HL-7702細(xì)胞活力顯著性降低(P<0.05),而且細(xì)胞內(nèi)ROS含量顯著上升(P<0.01);并且Hoechst33258染色實(shí)驗(yàn)和瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)結(jié)果顯示鎘誘導(dǎo)DNA產(chǎn)生了明顯的凋亡片段并誘導(dǎo)了細(xì)胞凋亡。
2.使用不同濃度的EGCG(50、100、200μM)對(duì)鎘(80μM)預(yù)處理48 h的肝細(xì)胞分別進(jìn)行3 h的干預(yù)后可以
3、使受損細(xì)胞的細(xì)胞活力得到不同程度的修復(fù),修復(fù)率分別為13.8%、33.9%和71.4%。與此同時(shí),EGCG對(duì)鎘誘導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)的ROS含量也具有明顯的清除作用(P<0.01)。
3.紫外-可見全波段掃描及核磁共振結(jié)果顯示EGCG和鎘離子(Cd2+)可能發(fā)生化學(xué)反應(yīng)。
本研究結(jié)果表明,EGCG與Cd2+可能發(fā)生化學(xué)反應(yīng),但是對(duì)于受到鎘損傷的HL-7702細(xì)胞,EGCG的保護(hù)機(jī)制主要是通過清除細(xì)胞內(nèi)鎘誘導(dǎo)產(chǎn)生的ROS
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