葛根素衍生物對大鼠腦缺血再灌注損傷的保護作用及其機制的研究.pdf

1、缺血性腦卒中是臨床發(fā)病率、死亡率和致殘率最高的疾病之一。腦缺血使局部腦組織血流下降，導(dǎo)致細胞功能的障礙及形態(tài)學(xué)的破壞。雖然再灌注可以使被阻塞的血管再通，恢復(fù)缺血腦組織的血液供應(yīng)，但客觀上卻加重了原有病變。臨床上溶栓劑n一PA(組織型纖溶酶原激活劑)的應(yīng)用所引起的血管再通，以及臨床上患者血管高達50％的自然再通，均可引起腦缺血再灌注損傷。而臨床現(xiàn)有的抗腦缺血再灌注損傷的神經(jīng)保護藥物數(shù)量不多、療效不佳且副作用較多，除在日本上市的自由基清除劑

2、依達拉奉的療效已被臨床驗證并己用于缺血性腦血管疾病外，其它藥物仍需進行進一步的臨床驗證。因此，研究和開發(fā)新的缺血性腦血管疾病治療藥物仍是當(dāng)務(wù)之急。 葛根素是從豆科植物野葛的干燥根中提取的單體，1993年在我國被批準上市，主要用于心腦血管疾病治療。它具有改善微循環(huán)和擴張冠狀動脈以及抗氧化、抗血小板聚集等藥理作用。但它在臨床應(yīng)用中也表現(xiàn)出較多的不良反應(yīng)，如溶血、發(fā)熱、過敏甚至致死反應(yīng)。為了進一步增強其藥理作用和臨床治療效果，減少不良

3、反應(yīng)，藥物工作者對葛根素的結(jié)構(gòu)進行了改造，合成了一系列具有活性的衍生物。本課題主要對合成的一系列葛根素衍生物中的G17及G20，觀察其對大鼠腦缺血再灌注損傷是否具有保護作用，并探討其作用機制。目前國內(nèi)外尚未見相關(guān)研究報道。 方法：以線栓法制作雄性SD(SpragueDawley)大鼠腦缺血再灌注模型(大腦中動脈阻塞1．5h后再灌注22．5小時)，靜脈注射給藥。通過評價缺血后4小時及24小時神經(jīng)行為學(xué)改變，缺血后24小時斷頭檢測其

4、腦梗塞面積及腦含水量的變化，腦組織切片HE染色觀察神經(jīng)元病理學(xué)改變，以觀察葛根素衍生物是否具有抗腦缺血再灌注損傷的神經(jīng)保護作用。以血清中丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)含量的變化及原位末端標記法(TUNEL)法檢測大腦神經(jīng)元凋亡數(shù)目的改變及SABC(鏈霉親和素生物素酶復(fù)合物)免疫組化法檢測其Caspase-3表達的情況來探討其作用機制。 結(jié)果：(1)G20(25mg／kg)及葛根素(25mg／kg)改善腦缺血后4h及2

5、4h的神經(jīng)肌肉運動功能和前庭運動功能，減少腦缺血再灌注后腦梗塞面積及降低腦含水量，減輕腦組織的病理形態(tài)學(xué)改變；(2)G20(25mg／kg)沒有明顯升高腦缺血再灌注后的SOD活性及減少MDA的量，但是卻減少了腦組織半暗帶凋亡細胞的數(shù)目，減少了Caspase一3的表達；(3)G17(12．5、25mg／kg)沒有明顯改善腦缺血后4h及24h的神經(jīng)翱肉運動功能和前庭運動功能，沒有明顯減少腦缺血再灌注后腦梗塞面積及降低腦含水量；但是G17(2

6、5mg／kg)明顯升高SOD活性及減少MDA的量。 結(jié)論：(1)G20(25mg／kg)對大鼠腦缺血再灌注損傷有保護作用；(2)G20(25mg／kg)可能通過抑制Caspase一3的表達發(fā)揮抗神經(jīng)元凋亡作用，而不是通過抗氧化作用對腦缺血再灌注損傷大鼠起到保護作用；(3)G17(12．5、25mg／kg)對大鼠腦缺血再灌注損傷沒有表現(xiàn)出明顯的保護作用。 缺血性腦卒中發(fā)病率高、死亡率高、致殘率高，其引起的生活質(zhì)量