葛根素納米給藥系統(tǒng)藥動學(xué)特性及對腦缺血再灌注損傷的保護作用研究.pdf

1、葛根素(Puerarin)是一種從中藥豆科植物野葛、甘葛藤根中提取的異黃酮類活性成分。研究顯示，葛根素具有抗氧化、降低膽固醇、降血糖、降血壓、解酒保肝等藥理活性，廣泛用于心腦血管疾病和糖尿病等的治療。體內(nèi)體外研究表明，葛根素可以通過對炎癥反應(yīng)、細胞凋亡和中性粒細胞活化等的抑制作用對腦缺血造成的組織損傷有保護作用。但是溶解度小、體內(nèi)半衰期短、腦組織中濃度低、口服生物利用度低等特點限制了其臨床應(yīng)用。
　　 近年來，納米(nanopa

2、rticles，NP)載藥系統(tǒng)被用于將藥物傳輸入腦和改善生物利用度。聚合納米粒作為藥物載體，可以提高體內(nèi)藥物濃度、控制藥物釋放并且可以減少毒副作用，是當今研究的熱點。聚氰基丙烯酸丁酯納米粒(polybutylcyanacrylate nanoparticles，PBCN)載藥系統(tǒng)可以通過表面修飾吐溫80(PS80)運載藥物穿過血腦屏障(blood brain barrier，BBB)，同時該載藥系統(tǒng)還可以提高藥物的口服生物利用度。

3、>　　 本研究以葛根素為模型藥物，制備葛根素聚氰基丙烯酸丁酯納米粒(puerarin polybutylcryanoacrylate nanoparticle，PUE-PBCN)，通過靜脈給藥小鼠藥代動力學(xué)和體內(nèi)組織分布研究，大鼠口服給藥體內(nèi)藥代動力學(xué)研究，以及腦缺血再灌注大鼠模型藥效學(xué)研究，從藥動學(xué)和藥效學(xué)角度評價PBCN作為腦靶向給藥載體的優(yōu)勢，并對其作為口服給藥載體進行初步研究。
　　 選用乳化聚合法制備PUE-PBCN

4、，在單因素考察的基礎(chǔ)上，采用正交設(shè)計優(yōu)化、篩選最佳處方和制備工藝，制備的工藝參數(shù)為：pH2，PUE0.3％(w/v)，BCA0.6％(v/v)，F(xiàn)68/Dex70(0.5％/0.5％，v/v)，乳化溫度25℃，攪拌速度400 r/min，攪拌時間4h。依據(jù)優(yōu)化處方制備的PUE-PBCN制劑的外觀為白色帶乳光膠體溶液，電鏡下觀察呈圓形，無粘連，平均包封率為48.75％，平均載藥量為15.02％，粒徑分布范圍較窄，平均粒徑159.4nm，z

5、eta電位-15mV。對PUE-PBCN進行差示掃描量熱法、紅外光譜和X-射線衍射分析，發(fā)現(xiàn)制成納米粒后PUE已被PBCN包裹或吸附，不再以晶體結(jié)構(gòu)存在，而是以非晶態(tài)存在。利用透析法考察了PUE-PBCN的體外釋藥行為，結(jié)果表明體外釋藥符合雙相動力學(xué)過程，前期藥物快速釋放，后期緩慢釋放，與葛根素對照溶液相比，PUE-PBCN具有顯著的緩釋作用。穩(wěn)定性考察實驗顯示PUE-PBCN4℃條件下保存較為穩(wěn)定。
　　 小鼠體內(nèi)PUE-PB

6、CN的藥代動力學(xué)和組織分布研究表明，小鼠尾靜脈注射PUE-PBCN(10mg/kg)與相同劑量PUE注射液相比，藥代動力學(xué)顯著改變，藥物體內(nèi)滯留時間增加，血藥濃度升高，AUC為后者的1.53倍。同時藥物在各組織中的MRT顯著增加，各組織AUC均較PUE注射液組增大，特別是腦組織AUC為PUE原藥組的2.63倍；大鼠口服PUE-PBCN與PUE混懸液后體內(nèi)藥代動力學(xué)過程研究表明，與混懸液相比PBCN能夠顯著提高PUE的生物利用度，相對生物

7、利用度為556.33％。
　　 以神經(jīng)功能學(xué)評分、實驗動物體重、腦含水量、腦梗死體積百分率、腦組織病理形態(tài)學(xué)變化及氧化應(yīng)激為主要評價指標，從藥效學(xué)方面觀察了PUE-PBCN靜脈注射給藥對腦缺血再灌注損傷的保護作用。實驗結(jié)果顯示：假手術(shù)組大鼠無明顯神經(jīng)功能缺損癥狀，體重減輕最小，左右腦含水量相似，腦梗塞面積最小，腦組織病理組織學(xué)觀察正常，腦組織和血清SOD活性均為各組中最高；模型組大鼠較假手術(shù)組觀察到明顯的神經(jīng)功能缺陷，體重減輕最

8、大，右側(cè)缺血大腦的腦含水量顯著高于左側(cè)正常大腦，梗塞面積顯著增大，病理組織學(xué)檢查顯示腦組織病變側(cè)海馬回及齒狀回組織結(jié)構(gòu)均消失，間質(zhì)大面積高度水腫，腦組織和血清SOD活性顯著最低，MDA含量增高；PUE及PUE-PBCN組均能夠改善大鼠各項評價指標，其中PUE-PBCN組與同劑量PUE溶液組相比，藥理活性顯著提高。
　　 本研究結(jié)果證實了PBCN有助于PUE透過血腦屏障，顯著增加PUE在腦組織的分布，改善PUE在胃腸道的吸收，提高