電針足少陽(yáng)經(jīng)穴對(duì)骨質(zhì)疏松大鼠OPG、RANKL及CBFa1mRNA表達(dá)的影響.pdf

1、目的:本實(shí)驗(yàn)旨在通過電針足少陽(yáng)經(jīng)穴干預(yù)骨質(zhì)疏松大鼠后,觀察分析骨組織相關(guān)因子OPG/RANKL mRNA和CBFa1mRNA表達(dá)的變化情況,以初步探討其作用的分子基礎(chǔ)和機(jī)制。
　　方法:實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為12月齡Wistar雌性大鼠40只,體重(220±10g),由瀘州醫(yī)學(xué)院動(dòng)物中心提供。實(shí)驗(yàn)期間所有大鼠均飼養(yǎng)在二級(jí)動(dòng)物室,溫度(25±1)℃,喂食正常飼料,自由飲水。按完全隨機(jī)分組法將40只大鼠隨機(jī)分為四組。假手術(shù)組(Sham group

2、)、模型對(duì)照組(OVX Control group, OVX-C)、模型加膽經(jīng)組(OVX acupuncture group,OVX-A)、模型加非經(jīng)穴針刺組(OVX Nonpoint Acupuncture group,OVX-N),10只/組。假手術(shù)組僅行雙側(cè)開腹手術(shù)不摘除卵巢。其余各組施行手術(shù)摘除雙側(cè)卵巢術(shù)。手術(shù)后所有動(dòng)物在同一條件(室溫19～24℃,相對(duì)濕度40％左右)用普通飼料飼養(yǎng),自由飲水。手術(shù)后三個(gè)月開始針刺OVX-A組:

3、陽(yáng)陵泉、環(huán)跳、懸鐘、京門穴,均施以提插捻轉(zhuǎn)平補(bǔ)平瀉手法后加以電針刺激,留針30分鐘,10次為一個(gè)療程,每天施針一次。一個(gè)療程完后休息五天,再繼續(xù)下個(gè)療程,共針刺6個(gè)療程。OVX-N組選大鼠后肢內(nèi)側(cè)非經(jīng)穴處(雙側(cè)),常規(guī)消毒后以毫針快速進(jìn)針后施以平補(bǔ)平瀉手法快速取針。Sham組、OVX-C組不作針刺。干預(yù)3個(gè)月停止干預(yù)再觀察3個(gè)月后,處死前一天分別置大鼠于代謝籠中,收集24h空腹尿液,置-20℃低溫冰箱保存待測(cè)。處死前用電子臺(tái)秤稱其重量。

4、全麻下心臟采血,血清分離保存待測(cè),快速取左側(cè)股骨,仔細(xì)剔盡附著的軟組織,置于凍存管內(nèi),置于-70℃低溫冰箱保存待測(cè)。
　　結(jié)果:1、造模3月、干預(yù)3月、觀察3月后,電針膽經(jīng)經(jīng)穴組OPG mRNA表達(dá)較模型組和假手術(shù)組OPG mRNA表達(dá)顯著降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);電針膽經(jīng)經(jīng)穴組OPG mRNA表達(dá)與非經(jīng)穴組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05);模型組OPG mRNA表達(dá)與假手術(shù)組之間比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。2

5、、電針膽經(jīng)組RANKL mRNA表達(dá)較模型組明顯降低,差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),與非經(jīng)穴組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);非經(jīng)穴組RANKL mRNA表達(dá)較模型組降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;模型組RANKL mRNA表達(dá)較其余三組均增高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。3、電針膽經(jīng)組OPG/RANKL mRNA的比值較假手術(shù)組降低明顯,差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),較非經(jīng)穴組和模型組無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);

6、非經(jīng)穴組和模型組之間比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);非經(jīng)穴組較假手術(shù)組降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);模型組與假手術(shù)組比較顯著降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。4、電針膽經(jīng)組CBFa1mRNA表達(dá)明顯高于假手術(shù)組,差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);電針膽經(jīng)組CBFa1mRNA表達(dá)高于非經(jīng)穴組,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.507),高于模型組,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.389);非經(jīng)穴組與假手術(shù)組比較增高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意

7、義(P<0.05);模型組與非經(jīng)穴組之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。
　　結(jié)論:1、電針足少陽(yáng)經(jīng)穴具有抑制骨吸收同時(shí)刺激骨形成的作用:電針少陽(yáng)通過抑制破骨細(xì)胞關(guān)鍵調(diào)控因子OPG和RANKL的mRNA表達(dá),提高OPG/RANKL兩者比值,抑制骨吸收;同時(shí)刺激成骨細(xì)胞骨形成特異性基因CBFa1mRNA表達(dá),增強(qiáng)骨形成,以促進(jìn)OB和OC相偶聯(lián),進(jìn)而達(dá)到和調(diào)骨重建的作用。2、電針足少陽(yáng)刺激成骨細(xì)胞骨形成特異性基因CBFa1mRNA表達(dá)增