電針足少陽經(jīng)穴對骨質(zhì)疏松大鼠OPG、RANKL及CBFa1mRNA表達的影響.pdf

1、目的:本實驗旨在通過電針足少陽經(jīng)穴干預骨質(zhì)疏松大鼠后,觀察分析骨組織相關因子OPG/RANKL mRNA和CBFa1mRNA表達的變化情況,以初步探討其作用的分子基礎和機制。
　　方法:實驗動物為12月齡Wistar雌性大鼠40只,體重(220±10g),由瀘州醫(yī)學院動物中心提供。實驗期間所有大鼠均飼養(yǎng)在二級動物室,溫度(25±1)℃,喂食正常飼料,自由飲水。按完全隨機分組法將40只大鼠隨機分為四組。假手術組(Sham group

2、)、模型對照組(OVX Control group, OVX-C)、模型加膽經(jīng)組(OVX acupuncture group,OVX-A)、模型加非經(jīng)穴針刺組(OVX Nonpoint Acupuncture group,OVX-N),10只/組。假手術組僅行雙側(cè)開腹手術不摘除卵巢。其余各組施行手術摘除雙側(cè)卵巢術。手術后所有動物在同一條件(室溫19～24℃,相對濕度40％左右)用普通飼料飼養(yǎng),自由飲水。手術后三個月開始針刺OVX-A組:

3、陽陵泉、環(huán)跳、懸鐘、京門穴,均施以提插捻轉(zhuǎn)平補平瀉手法后加以電針刺激,留針30分鐘,10次為一個療程,每天施針一次。一個療程完后休息五天,再繼續(xù)下個療程,共針刺6個療程。OVX-N組選大鼠后肢內(nèi)側(cè)非經(jīng)穴處(雙側(cè)),常規(guī)消毒后以毫針快速進針后施以平補平瀉手法快速取針。Sham組、OVX-C組不作針刺。干預3個月停止干預再觀察3個月后,處死前一天分別置大鼠于代謝籠中,收集24h空腹尿液,置-20℃低溫冰箱保存待測。處死前用電子臺秤稱其重量。

4、全麻下心臟采血,血清分離保存待測,快速取左側(cè)股骨,仔細剔盡附著的軟組織,置于凍存管內(nèi),置于-70℃低溫冰箱保存待測。
　　結(jié)果:1、造模3月、干預3月、觀察3月后,電針膽經(jīng)經(jīng)穴組OPG mRNA表達較模型組和假手術組OPG mRNA表達顯著降低,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01);電針膽經(jīng)經(jīng)穴組OPG mRNA表達與非經(jīng)穴組比較無統(tǒng)計學差異(P>0.05);模型組OPG mRNA表達與假手術組之間比較無統(tǒng)計學差異(P>0.05)。2

5、、電針膽經(jīng)組RANKL mRNA表達較模型組明顯降低,差異有顯著統(tǒng)計學意義(P<0.01),與非經(jīng)穴組比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05);非經(jīng)穴組RANKL mRNA表達較模型組降低,差異有統(tǒng)計學意義;模型組RANKL mRNA表達較其余三組均增高,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。3、電針膽經(jīng)組OPG/RANKL mRNA的比值較假手術組降低明顯,差異有顯著統(tǒng)計學意義(P<0.01),較非經(jīng)穴組和模型組無統(tǒng)計學意義(P>0.05);

6、非經(jīng)穴組和模型組之間比較無統(tǒng)計學意義(P>0.05);非經(jīng)穴組較假手術組降低,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01);模型組與假手術組比較顯著降低,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。4、電針膽經(jīng)組CBFa1mRNA表達明顯高于假手術組,差異有顯著統(tǒng)計學意義(P<0.01);電針膽經(jīng)組CBFa1mRNA表達高于非經(jīng)穴組,差異無統(tǒng)計學意義(P=0.507),高于模型組,差異無統(tǒng)計學意義(P=0.389);非經(jīng)穴組與假手術組比較增高,差異有統(tǒng)計學意

7、義(P<0.05);模型組與非經(jīng)穴組之間無統(tǒng)計學差異(P>0.05)。
　　結(jié)論:1、電針足少陽經(jīng)穴具有抑制骨吸收同時刺激骨形成的作用:電針少陽通過抑制破骨細胞關鍵調(diào)控因子OPG和RANKL的mRNA表達,提高OPG/RANKL兩者比值,抑制骨吸收;同時刺激成骨細胞骨形成特異性基因CBFa1mRNA表達,增強骨形成,以促進OB和OC相偶聯(lián),進而達到和調(diào)骨重建的作用。2、電針足少陽刺激成骨細胞骨形成特異性基因CBFa1mRNA表達增