補腎化痰方對去勢骨質(zhì)疏松大鼠OPG-RANKL-RANK通路影響的研究.pdf

1、目的：
　　從理論角度分析絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松的病因病機，并通過實驗研究觀察去勢骨質(zhì)疏松大鼠OPG/RANKL/RANK信號通路變化，探討補腎化痰方對PMOP的治療作用及作用機制，為補腎化痰方的臨床應用提供科學依據(jù)。
　　方法：
　　1、理論研究
　　對古今相關(guān)文獻進行系統(tǒng)的回顧總結(jié)，以了解中醫(yī)對PMOP的病因病機及治則治法的認識，為臨床試驗研究提供理論依據(jù)。
　　2、實驗研究
　　選取SPF級6月齡SD雌

2、性大鼠，按體重分層后隨機分為模型組、假手術(shù)組、補腎組、補腎化痰組。采用去勢法建立絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥動物模型。術(shù)后5周開始灌胃給藥。補腎組以補腎方（組成：菟絲子30g、淫羊藿10g、補骨脂15g）灌胃，補腎化痰組以補腎化痰方（組成：菟絲子30g、淫羊藿10g、補骨脂15g、全瓜萎15g、紅曲12g,山楂20g）灌胃，模型組、假手術(shù)組以等體積的生理鹽水灌胃。給藥8周后，麻醉處死大鼠，摘除雙側(cè)眼球取血離心，取血清，ELISA法檢測各組大鼠血清中

3、OPG、RANKL的含量；取大鼠右后肢股骨組織，Western Blot法檢測OPG、RANKL蛋白的表達。
　　統(tǒng)計學處理：采用SPSS19.0統(tǒng)計軟件進行方差分析，所有數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標準差(-x±s)表示，組間數(shù)據(jù)比較采用 ONE-WAY ANOVA(單因素方差分析），P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。
　　結(jié)果：
　　1、理論研究
　　查閱文獻，研究表明OPG/RANKL/RANK信號通路是骨代謝過程中重要的

4、信號通路，能夠影響PMOP的發(fā)病?；仡櫣沤裱芯縋MOP的相關(guān)文獻，對PMOP的病因病機的認識主要包括腎虛髓虧、脾胃虛弱、肝血不足、瘀血阻滯。而基于脂代謝異常與PMOP有關(guān)的認識，導師向楠教授提出痰濁也是OP發(fā)病的重要因素，并據(jù)此制定治療PMOP的新治法——補腎化痰法，所選補腎化痰方為導師向楠教授臨床經(jīng)驗方，在臨床和動物實驗中都已初步證實，補腎化痰方對PMOP有較好的治療效果。而補腎化痰方是否能夠影響OPG/RANKL/RANK信號通路還

5、有待進一步的研究。
　　2、實驗研究
　?。?）各組大鼠血清OPG、RANKL、OPG/RANKL的水平：模型組與假手術(shù)組相比，血清OPG含量降低，血清RANKL含量增高，OPG/RANKL的比值降低，差異均有顯著統(tǒng)計學意義（P＜0.01）；與模型組比較，補腎組及補腎化痰組的血清OPG含量及OPG/RANKL的比值均增高，血清RANKL含量均降低，差異均有顯著統(tǒng)計學意義（P＜0.01）；與補腎組比較，補腎化痰組的血清OPG水

6、平及OPG/RANKL的比值更高，血清RANKL含量更低，差異有顯著統(tǒng)計學意義（P＜0.01）。
　?。?）各組大鼠骨組織OPG、RANKL、OPG/RANKL的水平：模型組與假手術(shù)組大鼠相比，骨組織OPG表達降低，骨組織RANK表達增高，OPG/RANKL的比值降低，差異有顯著統(tǒng)計學意義（P＜0.01）；與模型組比較，補腎組及補腎化痰組的骨組織OPG表達及OPG/RANKL的比值增加，骨組織
　　RANKL表達均降低，差異

7、有顯著統(tǒng)計學意義（P＜0.01）；與補腎組比較，補腎化痰組的骨組織RANKL及OPG表達均更低，差異有顯著統(tǒng)計學意義（P＜0.01）,OPG/RANKL的比值更高，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。
　　結(jié)論：
　　在中醫(yī)理論指導下，應用補腎化痰方治療絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥有理論基礎(chǔ)，也有實驗研究支持。實驗研究所用補腎化痰方能增加去勢大鼠血清及骨組織 OPG的含量，降低血清和骨組織 RANKL的含量，上調(diào) OPG/RANKL的比值