補(bǔ)腎化痰方對(duì)去勢(shì)骨質(zhì)疏松大鼠OPG-RANKL-RANK通路影響的研究.pdf

1、目的：
　　從理論角度分析絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松的病因病機(jī)，并通過(guò)實(shí)驗(yàn)研究觀察去勢(shì)骨質(zhì)疏松大鼠OPG/RANKL/RANK信號(hào)通路變化，探討補(bǔ)腎化痰方對(duì)PMOP的治療作用及作用機(jī)制，為補(bǔ)腎化痰方的臨床應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。
　　方法：
　　1、理論研究
　　對(duì)古今相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行系統(tǒng)的回顧總結(jié)，以了解中醫(yī)對(duì)PMOP的病因病機(jī)及治則治法的認(rèn)識(shí)，為臨床試驗(yàn)研究提供理論依據(jù)。
　　2、實(shí)驗(yàn)研究
　　選取SPF級(jí)6月齡SD雌

2、性大鼠，按體重分層后隨機(jī)分為模型組、假手術(shù)組、補(bǔ)腎組、補(bǔ)腎化痰組。采用去勢(shì)法建立絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥動(dòng)物模型。術(shù)后5周開(kāi)始灌胃給藥。補(bǔ)腎組以補(bǔ)腎方（組成：菟絲子30g、淫羊藿10g、補(bǔ)骨脂15g）灌胃，補(bǔ)腎化痰組以補(bǔ)腎化痰方（組成：菟絲子30g、淫羊藿10g、補(bǔ)骨脂15g、全瓜萎15g、紅曲12g,山楂20g）灌胃，模型組、假手術(shù)組以等體積的生理鹽水灌胃。給藥8周后，麻醉處死大鼠，摘除雙側(cè)眼球取血離心，取血清，ELISA法檢測(cè)各組大鼠血清中

3、OPG、RANKL的含量；取大鼠右后肢股骨組織，Western Blot法檢測(cè)OPG、RANKL蛋白的表達(dá)。
　　統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行方差分析，所有數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(-x±s)表示，組間數(shù)據(jù)比較采用 ONE-WAY ANOVA(單因素方差分析），P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果：
　　1、理論研究
　　查閱文獻(xiàn)，研究表明OPG/RANKL/RANK信號(hào)通路是骨代謝過(guò)程中重要的

4、信號(hào)通路，能夠影響PMOP的發(fā)病?；仡櫣沤裱芯縋MOP的相關(guān)文獻(xiàn)，對(duì)PMOP的病因病機(jī)的認(rèn)識(shí)主要包括腎虛髓虧、脾胃虛弱、肝血不足、瘀血阻滯。而基于脂代謝異常與PMOP有關(guān)的認(rèn)識(shí)，導(dǎo)師向楠教授提出痰濁也是OP發(fā)病的重要因素，并據(jù)此制定治療PMOP的新治法——補(bǔ)腎化痰法，所選補(bǔ)腎化痰方為導(dǎo)師向楠教授臨床經(jīng)驗(yàn)方，在臨床和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中都已初步證實(shí)，補(bǔ)腎化痰方對(duì)PMOP有較好的治療效果。而補(bǔ)腎化痰方是否能夠影響OPG/RANKL/RANK信號(hào)通路還

5、有待進(jìn)一步的研究。
　　2、實(shí)驗(yàn)研究
　?。?）各組大鼠血清OPG、RANKL、OPG/RANKL的水平：模型組與假手術(shù)組相比，血清OPG含量降低，血清RANKL含量增高，OPG/RANKL的比值降低，差異均有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；與模型組比較，補(bǔ)腎組及補(bǔ)腎化痰組的血清OPG含量及OPG/RANKL的比值均增高，血清RANKL含量均降低，差異均有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；與補(bǔ)腎組比較，補(bǔ)腎化痰組的血清OPG水

6、平及OPG/RANKL的比值更高，血清RANKL含量更低，差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。
　?。?）各組大鼠骨組織OPG、RANKL、OPG/RANKL的水平：模型組與假手術(shù)組大鼠相比，骨組織OPG表達(dá)降低，骨組織RANK表達(dá)增高，OPG/RANKL的比值降低，差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；與模型組比較，補(bǔ)腎組及補(bǔ)腎化痰組的骨組織OPG表達(dá)及OPG/RANKL的比值增加，骨組織
　　RANKL表達(dá)均降低，差異

7、有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；與補(bǔ)腎組比較，補(bǔ)腎化痰組的骨組織RANKL及OPG表達(dá)均更低，差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）,OPG/RANKL的比值更高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　結(jié)論：
　　在中醫(yī)理論指導(dǎo)下，應(yīng)用補(bǔ)腎化痰方治療絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥有理論基礎(chǔ)，也有實(shí)驗(yàn)研究支持。實(shí)驗(yàn)研究所用補(bǔ)腎化痰方能增加去勢(shì)大鼠血清及骨組織 OPG的含量，降低血清和骨組織 RANKL的含量，上調(diào) OPG/RANKL的比值