南極海茸(Durvillaea antarctica)多糖提取、衍生物制備及免疫活性研究.pdf

1、本文通過(guò)對(duì)南極海茸（Durvillaea antarctica）為原料，通過(guò)傳統(tǒng)提取方法和纖維素酶提取法提取南極海茸粗多糖。并對(duì)傳統(tǒng)常溫水提所得粗多糖純化，通過(guò)采用硫酸-苯酚法、Folin-酚法、柱前衍生高效液相色譜法和多角度高效凝膠滲透色譜與多角度激光光散射器聯(lián)用(HPGPC-MALLS)法對(duì)DAC的總糖含量、蛋白含量、單糖組成和分子量進(jìn)行分析，并通過(guò)甲基化和氣質(zhì)聯(lián)用(GC-MS)、傅里葉變換紅外光譜(FTIR)和核磁共振波譜(NMR

2、)對(duì)其結(jié)構(gòu)進(jìn)行表征。對(duì)純化后組分進(jìn)行衍生物制備及免疫活性方面研究。所得結(jié)論主要如下:
　　本文通過(guò)對(duì)南極海茸（Durvillaea antarctica）為原料，探討其多糖的纖維素酶、冷水、熱水、堿提取，比較分析了所得粗多糖的理化性質(zhì)及基本結(jié)構(gòu)表征。采用傳統(tǒng)提取方法和纖維素酶提取法，得到17種海茸粗多糖:8種褐藻膠，8種褐藻糖膠，1種兩者的混合物。采用纖維素酶提取方法對(duì)南極海茸進(jìn)行提取，酶量越大所提的粗褐藻膠得率越低，粗褐藻糖膠所

3、得量越高，粗總糖所得也越高。纖維素酶法所得粗總多糖量比水提法的要高。纖維素酶-水溶液提取的褐藻膠M/G比明顯高于酶提后堿提的褐藻膠，也高于冷水提的褐藻膠，同時(shí)酶量越大M/G比越大。南極海茸多糖的纖維素酶法與傳統(tǒng)方法所得多糖在單糖及官能團(tuán)組成基本上無(wú)明顯差異，但纖維素酶提取的上清醇沉的粗多糖褐藻糖膠、褐藻淀粉分子量比水提、堿提的分子量要大許多。
　　本文通過(guò)對(duì)水提組分進(jìn)行分離與純化獲得1種水溶性葡聚糖(DAC)，通過(guò)結(jié)構(gòu)表征及體外免

4、疫活性研究，結(jié)果表明，純化得到的DAC是一種總糖含量達(dá)97.5％，蛋白含量和分子量分別為2.0％和18.3 kDa的葡聚糖。經(jīng)甲基化和NMR分析結(jié)果表明，DAC是以→3)Glc(β1→為主鏈，并含有少量→6)Glc(α/β1→分支的葡聚糖。體外免疫活性中在濃度為50μg·mL-1時(shí)，DAC對(duì)巨噬細(xì)胞的吞噬能力促進(jìn)最強(qiáng)。
　　本文通過(guò)對(duì)純化水溶性葡聚糖進(jìn)行羧甲基化、磺化及羧甲基化產(chǎn)物磺化制備三種衍生物，并進(jìn)行體外免疫活性研究。結(jié)果表