紅霉素對(duì)博來霉素致大鼠肺纖維化中ILK、E-鈣粘素、α-平滑肌蛋白表達(dá)的影響.pdf

1、目的：
　　使用博來霉素復(fù)制大鼠肺纖維化模型，探討整合素連接激酶（ILK）、E-鈣粘素（e-cadherin，E-cad）、α-平滑肌蛋白（α-SMA）在肺纖維化過程中的表達(dá)及紅霉素的干預(yù)作用。
　　方法：
　　健康雄性SD大鼠90只，隨機(jī)分為6組，每組15只，分別為第1組正常對(duì)照組；第2組模型組；第3組造模前三天連續(xù)給紅霉素，然后予以博萊霉素（bleomycin，BLM）造模；第4組BLM造模后2h開始給紅霉素，共給

2、14d；第5組BLM造模后第14d開始給紅霉素，至第28d；第6組BLM造模前三天連續(xù)給紅霉素至造模后第28d。2至6組氣管內(nèi)予以BLM(5mg/g)制作肺纖維化動(dòng)物模型，1組氣管內(nèi)予以等體積生理鹽水，造模后各組按方案進(jìn)行給藥。分別于7、14、28d隨即各處死5只，取左肺組織放于4％甲醛固定后做HE染色及免疫組化檢測(cè)ILK、E-cad、α-SMA蛋白的表達(dá)；取右肺組織進(jìn)行羥脯氨酸檢測(cè)和RT-PCR檢測(cè)ILKmRNA、E-cadherin

3、 mRNA、α-SMA mRNA的表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　1.HE染色顯示：第2組7d組織以炎癥反應(yīng)為主，可見肺成纖維細(xì)胞；14d見大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，較多肺成纖維細(xì)胞；28d見大量肺成纖維細(xì)胞，說明肺纖維化模型形成。第2至6組病理改變趨勢(shì)相同，逐漸向肺纖維化發(fā)展，但第6組纖維化程度最輕。
　　2.HYP含量：7d、14d、28d與空白對(duì)照組比，2-6組含量均增高，且P＜0.05，以第2組升高最為明顯；3、5組各時(shí)間段H

4、YP檢測(cè)與2組相比無(wú)明顯變化；4、6組予以紅霉素干預(yù)后，含量均有所下降，且P＜0.05以第6組28d最為顯著，P＜0.01。
　　3.RT-PCR、免疫組化顯示：在正常肺組織中，ILK、α-SMA表達(dá)為低表達(dá)，E-cad為高表達(dá)。肺纖維化發(fā)生時(shí)，與正常組織相比較，ILK、α-SMA表達(dá)增強(qiáng)（P＜0.05），E-cad表達(dá)減弱（P＜0.05）；予以紅霉素干預(yù)后，與模型組相比較，第4、6組ILK、α-SMA表達(dá)水平下降，E-cad上升