紅霉素對(duì)慢性阻塞性肺疾病大鼠MMP-9水平的影響.pdf

1、目的：本實(shí)驗(yàn)通過(guò)COPD大鼠模型并予以紅霉素干預(yù)觀察大鼠肺內(nèi)MMP-9表達(dá)水平的變化。通過(guò)本實(shí)驗(yàn)認(rèn)識(shí)和探討體內(nèi)實(shí)驗(yàn)紅霉素對(duì)COPD大鼠肺內(nèi)MMP-9表達(dá)的影響，進(jìn)一步認(rèn)識(shí)紅霉素的抗炎作用，開(kāi)拓紅霉素在COPD的應(yīng)用價(jià)值。 方法：健康雄性Wistar大鼠36只(中南大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)部提供)，雄性，白色，SPF級(jí)，體重220±20 g。在安靜、室溫、避強(qiáng)光的環(huán)境中自由進(jìn)食和飲水一周。36只Wister大鼠隨機(jī)分為3組，每組12只：CO

2、PD模型組，第1、14天注射脂多糖(LPS)200ug/100ul，第2～13天、15～30天每日上午在72升(30cm×40cm×60cm)自制有機(jī)玻璃箱內(nèi)被動(dòng)吸煙，每天上午1次，每次12支，每次持續(xù)0.5h。紅霉素干預(yù)組，造模方法同COPD組，每天熏煙前用紅霉素灌胃治療(劑量100mg/kg，配制成1.25％紅霉素口服液)，從第17天開(kāi)始進(jìn)行，經(jīng)氣管內(nèi)注入LPS的條件、煙熏條件以及持續(xù)時(shí)間均同COPD組，給藥2周；正常對(duì)照組，標(biāo)準(zhǔn)飼

3、養(yǎng)30天，不做任何干預(yù)，第1、14天氣管內(nèi)注入生理鹽水100ul。大鼠肺功能測(cè)定由湘雅醫(yī)學(xué)院病理生理研究所完成，經(jīng)微機(jī)處理計(jì)算出FEV0.3/FVC、R1及Cdyn。左肺10％的中性福爾馬林灌注固定20min，再浸入福爾馬林固定，常規(guī)脫水，石蠟包埋，切片，HE 染色，以進(jìn)行病理形態(tài)學(xué)觀察和免疫組化檢測(cè)。用免疫組化方法檢測(cè)各組大鼠肺組織MMP-9的表達(dá)，逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(reverse transcription-polymerase

4、chain reaction，RT-PCR)檢測(cè)各組大鼠肺組織MMP-9 mRNA表達(dá)水平。 結(jié)果：(1)模型組及干預(yù)組大鼠漸出現(xiàn)飲食、活動(dòng)減少，平均體重較正常對(duì)照組減輕，后期可見(jiàn)毛發(fā)干枯、發(fā)黃，可聽(tīng)到喘息音，正常對(duì)照組未見(jiàn)以上情況出現(xiàn)。(2)模型組及干預(yù)組大鼠FEV0.3/FVC(％)、R1(氣道阻力)、Cdyn(動(dòng)態(tài)肺順應(yīng)性)均明顯低于正常對(duì)照組，差異有顯著性(均P(0.05)，說(shuō)明小氣道氣道阻力增加，存在明顯氣流受限、阻塞

5、性肺通氣功能障礙。(3)光鏡下模型組及干預(yù)組大鼠肺組織符合慢性支氣管炎和阻塞性肺氣腫病理改變。(4)模型組肺組織中MMP-9蛋白平均陽(yáng)性系數(shù)顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，干預(yù)組與模型組比較陽(yáng)性系數(shù)降低(P<0.05)。(5)模型組大鼠肺組織中MMP-9mRNA表達(dá)量高，其光密度比值顯著高于正常對(duì)照組(P<0.05)；干預(yù)組與模型組光密度比值比較亦降低(P<0.05)。 結(jié)論：(1)采用被動(dòng)吸煙和LPS氣道內(nèi)滴注相結(jié)合構(gòu)建的大鼠