二甲基甲酰胺對雄性小鼠的生殖毒性研究.pdf

1、二甲基甲酰胺(Dimethylformamide，DMF)是一種重要的有機(jī)化工原料、農(nóng)藥和醫(yī)藥中間體，也是性能優(yōu)良的溶劑和多種氣體的吸附劑，廣泛應(yīng)用于化學(xué)纖維、皮革、染料及制藥等工業(yè)生產(chǎn)中。隨著現(xiàn)代工業(yè)的發(fā)展，DMF的需求量在逐年增加，職業(yè)接觸DMF的工人也越來越多，DMF對工人健康的影響逐漸引起人們的重視。1948年Smyth等首先報道了DMF的毒性和職業(yè)危害，引起各國科學(xué)家對DMF毒性的關(guān)注。80年代以來我國已有數(shù)百例DMF職業(yè)中毒

2、發(fā)生。DMF屬中等毒性物質(zhì)，人群對DMF的暴露是多途徑的，職業(yè)環(huán)境中DMF主要經(jīng)呼吸道，也可經(jīng)皮膚、消化道進(jìn)入體內(nèi)。DMF可對全身多個器官及系統(tǒng)產(chǎn)生毒性。以往研究中，國內(nèi)外大多數(shù)學(xué)者都將對DMF的研究重點放在其肝毒性上，而對生殖系統(tǒng)尤其是雄性生殖系統(tǒng)的毒作用研究較少。因此，我們就DMF對雄性生殖系統(tǒng)的影響進(jìn)行研究，并進(jìn)一步探討其作用機(jī)制。 目的： 通過對雄性昆明小鼠亞慢性染毒，對小鼠的睪丸組織結(jié)構(gòu)，睪丸及附睪臟器系數(shù)，精

3、子的計數(shù)、活動度、畸形率以及睪丸酶活性、性激素的變化進(jìn)行觀察，探討DMF對雄性生殖系統(tǒng)的影響及其作用機(jī)制，為DMF衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)的制定和其生殖危害的防治提供科學(xué)依據(jù)。 方法： 昆明小鼠40只，體重為(25±2)g，飼養(yǎng)條件為每天光照12h，普通飼料喂養(yǎng)，溫度為(23±2)℃，相對濕度為(50±10)％。適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后，隨機(jī)分為空白對照組和低、中、高三個劑量組，每組10只。染毒劑量分別為0、0.5、1和2g/kg(body w

4、eight)。每天灌胃染毒一次，連續(xù)灌胃30天。于染毒前1天對小鼠稱重，以后每3天稱重1次。30天后摘除眼球取血并頸椎脫臼處死。所取血液在室溫下靜置一小時后，置離心機(jī)中離20分(3000pm/min)，吸取上清液，-20℃保存用于測定血清睪酮(T)、黃體生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)水平。分離雙側(cè)睪丸和附睪，稱重并計算臟器系數(shù)。每組隨機(jī)抽取兩個動物的一側(cè)睪丸，放入預(yù)先配制好的中性福爾馬林溶液(4％甲醛)中進(jìn)行固定，用于制作病理切片

5、，其余睪丸-80℃保存，用作睪丸琥珀酸脫氫酶(SDH)、乳酸脫氫酶(LDH)、酸性磷酸酶(ACP)、超氧化物歧化酶(SOD)活力及丙二醛(MDA)和睪酮(T)水平的測定。取右側(cè)附睪用作精子活動度的測定，左側(cè)附睪置-20℃保存，用作精子計數(shù)和精子畸形率的測定。 結(jié)果： 1.DMF對雄性小鼠體重、臟器重量及臟器系數(shù)的影響與對照組相比，各染毒組小鼠實驗后體重顯著降低(P<0.05)。小鼠睪丸、附睪重量及睪丸臟器系數(shù)隨染毒劑量增

6、高有下降趨勢。與對照組相比，2g/kg劑量組睪丸重量(P<0.01)、附睪重量(P<0.05)及睪丸臟器系數(shù)顯著降低(P<0.01)。 2.DMF對雄性小鼠精子計數(shù)、精子活動度及精子畸形率的影響隨染毒劑量的增高，精子計數(shù)及精子活動度有下降的趨勢，呈劑量.效應(yīng)關(guān)系，且1g/kg和2g/kg劑量組精子計數(shù)與對照組相比顯著降低(P<0.05)。精子活動度與對照組相比顯著降低(P<0.01)。各劑量組精子畸形率與對照組相比均無明顯變化(

7、P>0.05)。 3.DMF對雄性小鼠睪丸酶活力及MDA含量的影響隨染毒劑量增高睪丸組織中ACP、SOD活力及MDA含量均有增高趨勢，LDH、SDH活力有下降趨勢。各劑量組ACP活力顯著高于對照組(P<0.01)，1g/kg和2g/kg劑量組SOD活力顯著高于對照組(P<0.01)，SDH活力顯著低于對照組(P<0.01)，2g/kg劑量組睪丸MDA含量顯著高于對照組(P<0.01)，各劑量組LDH活力顯著低于對照組(P<0.0

8、1)。 4.DMF對雄性小鼠血清及睪丸組織中性激素的影響各劑量組血清LH水平與對照組相比無明顯變化(P>0.05)；各劑量組血清FSH水平均高于對照組，1g/kg和2g/kg劑量組血清FSH水平顯著高于對照組，(P<0.05)；各劑量組血清T和睪丸T均低于對照組，2g/kg劑量組血清T和睪丸T水平顯著低于對照組(P<0.01)。 5.DMF對雄性小鼠睪丸組織結(jié)構(gòu)的影響睪丸組織的病理切片顯示，染毒組小鼠睪丸曲細(xì)精管明顯萎縮

9、，曲細(xì)精管中各級精母細(xì)胞減少，細(xì)胞間有中毒空泡，個別曲細(xì)精管管腔中可見脫落的生精細(xì)胞，管腔內(nèi)成熟精子變少或消失。間質(zhì)疏松，血管擴(kuò)張。 結(jié)論： 1.DMFq～慢性染毒可以使小鼠睪丸及附睪重量下降，睪丸臟器系數(shù)降低。 2.DMF亞慢性染毒可以引起小鼠精子計數(shù)及精子活動度下降。 3.DMF亞慢性染毒能引起小鼠睪丸組織的形態(tài)改變。 4.DMF亞慢性染毒會對小鼠睪丸T、血清T和血清FSH產(chǎn)生顯著影響。