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文檔簡介
1、目的:研究表明,微循環(huán)障礙是高壓電燒傷重要的病理變化之一,在電燒傷后的漸進(jìn)性損傷發(fā)生和發(fā)展過程中起重要作用,并發(fā)現(xiàn)電傷后的微循環(huán)障礙主要由微血管損傷及微血流障礙所致。在微血管損傷方面,除電流的直接損傷外,繼發(fā)的炎癥損傷也是微血管損傷的重要機(jī)制。白細(xì)胞介素-1(interleukin-1,IL-1)、白細(xì)胞介素-6(interleukin-6,IL-6)及可溶性血管細(xì)胞黏附分子-1(solublevascuolarcelladhesion
2、molecule,sVCAM-1)等細(xì)胞因子均在炎癥損傷過程中發(fā)揮重要作用。目前高壓電燒傷后微血管炎性損傷機(jī)制尚不清楚。本研究通過檢測高壓電燒傷大鼠血清IL-1、IL-6及sVCAM-1的變化,并通過烏司他丁(UTI)干預(yù),旨在進(jìn)一步探索高壓電致微血管炎性損傷的相關(guān)機(jī)制和干預(yù)辦法。
方法:1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組:健康成年SD大鼠(河北醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供,合格證編號1211057)180只,按隨機(jī)數(shù)字表法分成三組,即假高壓電
3、燒傷組(簡稱對照組)、高壓電燒傷組(簡稱電傷組)、高壓電燒傷烏司他丁(UTI)治療組(簡稱治療組),每組各60只。每組又按觀察時(shí)間分為傷前15min、傷后5min、1h、2h、4h、8h六個(gè)時(shí)相組,每時(shí)相組10只。
2.實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:將大鼠編號、稱重,左上肢、右上肢及前胸脫毛,記錄數(shù)據(jù)。實(shí)驗(yàn)藥品按所需濃度配制。
3.高壓電燒傷模型制作:首先連接實(shí)驗(yàn)變壓器和調(diào)壓器導(dǎo)線。用1%戊巴比妥鈉生理鹽水溶液腹腔注射麻醉大鼠
4、(40mg/kg),麻醉成功后,將大鼠取仰臥位放置于電擊實(shí)驗(yàn)臺上,繩子固定四肢,將兩個(gè)1cm×1cm方形銅質(zhì)電極片分別固定于大鼠的左上肢(電流入口)、右下肢(電流出口)脫毛區(qū)。接通電源,調(diào)整調(diào)壓器使升壓器輸出電壓至2kV,接通升壓器輸出電源,使高壓電流通過大鼠,電擊時(shí)間為3s。對照組予以假電(即只連電線,不通電),其他條件各組均相同。電傷后5min內(nèi),治療組腹腔注射1%UTI(按5×104u/kg即5mL/kg給藥),對照組及電傷組腹腔
5、內(nèi)注射5mL/kg生理鹽水。
4.標(biāo)本采集與保存:將模型制作成功的大鼠開胸暴露心臟,直視下采血器刺入心臟,連接真空采血管取血4mL,靜置30min,待血清析出后上離心機(jī),以3000轉(zhuǎn)/min離心10min,取上清液置于Eppendorf管中在-70℃條件下保存。
5.指標(biāo)檢測:采用ELISA雙抗體夾心法,分別檢測三組大鼠六個(gè)時(shí)相組血清IL-1、IL-6及sVCAM-1含量。
6.實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)處理:采
6、用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件,實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差((x)±s)表示,行兩因素析因設(shè)計(jì)的方差分析,多重比較采用LSD法t檢驗(yàn)。以P<0.05為顯著性檢驗(yàn)水準(zhǔn)。
結(jié)果:1.大鼠血清IL-1含量變化
電傷組IL-1含量總體高于對照組(主效應(yīng)F=111.917,P<0.01);電傷組IL-1含量受時(shí)間變量影響(主效應(yīng)F=5.202,P<0.01),傷后5min~8h各時(shí)相均高于本組傷前值(P<0.001),且呈逐
7、漸增高趨勢。
治療組IL-1含量總體低于電傷組(主效應(yīng)F=9.865,P<0.01);治療組IL-1含量受時(shí)間變量影響(主效應(yīng)F=11.503,P<0.01),治療組傷后5min~8h各時(shí)相均高于本組傷前值(P<0.001),且呈逐漸增高趨勢。
2.大鼠血清IL-6含量變化
電傷組IL-6含量總體高于對照組(主效應(yīng)F=117.424,P<0.01);電傷組IL-6含量受時(shí)間變量影響(主效應(yīng)F=5
8、.214,P<0.01),傷后1~8h各時(shí)相均高于本組傷前值(P<0.001),且呈逐漸增高趨勢。
治療組IL-6含量總體低于電傷組(主效應(yīng)F=17.426,P<0.01);治療組IL-6含量受傷后時(shí)間變化影響(主效應(yīng)F=13.177,P<0.01),治療組傷后1~8h各時(shí)相均高于本組傷前值(P<0.001),且呈逐漸增高趨勢。
3.大鼠血清sVCAM-1含量變化
電傷組sVCAM-1含量總體高
9、于對照組(主效應(yīng)F=46.031,P<0.01);電傷組sVCAM-1含量受時(shí)間變量影響(主效應(yīng)F=3.391,P<0.01),傷后1~8h各時(shí)相均高于本組傷前值(P<0.001),且呈逐漸增高趨勢。
治療組sVCAM-1含量總體低于電傷組(主效應(yīng)F=6.770,P<0.01);治療組sVCAM-1含量受傷后時(shí)間變化影響(主效應(yīng)F=4.717,P<0.01),治療組傷后1~8h各時(shí)相均高于本組傷前值(P<0.001),且呈
10、增高趨勢。
結(jié)論:1.高壓電燒傷引起大鼠血清IL-1、IL-6及sVCAM-1含量升高,IL-1、IL-6在傷后8h內(nèi)呈逐漸升高趨勢,sVCAM-1在傷后1h達(dá)高峰,后有下降趨勢,但仍高于傷前水平。
2.高壓電通過刺激機(jī)體產(chǎn)生sVCAM-1增加白細(xì)胞與血管內(nèi)皮細(xì)胞的黏附性,與IL-1、IL-6共同促進(jìn)炎癥反應(yīng),加重血管壁損傷,影響微循環(huán)血液流動(dòng)。
3.UTI抑制大鼠高壓電燒傷后血清IL-1、IL
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