大鼠心肺復(fù)蘇后心腦損傷及烏司他丁的干預(yù)作用.pdf

1、目的： 通過觀察大鼠心肺復(fù)蘇(CPR)后血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌鈣蛋白I(cTnI)、S100B蛋白、神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)、缺氧誘導(dǎo)因子-1α(HIF-1α)、腦紅蛋白(NGB)濃度變化，皮層S100B蛋白、NSE、HIF-1α、NGB表達，心肌和大腦皮層的組織病理改變，并用烏司他丁注射液進行干預(yù)，研究大鼠CPR后心、腦的損傷機制及烏司他丁注射液的保護作用。 方法： 成年雄性Sprague-

2、Dauley(SD)大鼠120只，隨機分為假手術(shù)對照組(對照組)、常規(guī)復(fù)蘇組(復(fù)蘇組)、常規(guī)復(fù)蘇加藥物組(藥物組)，每組按氣管切開后(對照組)或自主循環(huán)恢復(fù)(ROSC)后(復(fù)蘇組、藥物組)0.5h、3h、6h、12h、24h分為5個亞組(n=8)。復(fù)蘇組、藥物組采用窒息致大鼠心臟驟停(CA)與CPR模型，藥物組于ROSC后2min內(nèi)經(jīng)頸動脈推注注射用烏司他丁(100000u/kg)。對照組僅施行麻醉、氣管切開、血管穿刺等操作。各組于相應(yīng)

3、時間點取血和組織標(biāo)本。以干濕比質(zhì)量法測定腦組織含水量，免疫抑制法測定血清CK-MB含量，Access免疫化學(xué)發(fā)光分析儀及其配套試劑定量測定血清cTnI含量，雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸收分析法(ELISA)測定血清S100B蛋白、NSE、HIF-1α、NGB水平，免疫組化法測定皮層S100B蛋白、NSE、HIF-1α、NGB表達，光鏡和電鏡下觀察心肌和大腦皮層的組織病理改變。 結(jié)果： 1.復(fù)蘇組和藥物組大鼠血清CK-MB含量從R

4、OSC后0.5h開始明顯升高，并持續(xù)上升至12h達高峰，24h有所回落，與對照組比較，各時間點血清CK-MB含量均顯著增高(P<0.01)；與復(fù)蘇組比較，藥物組ROSC后3h、6h、12h、24h血清CK-MB含量顯著降低(P<0.05或P<0.01)。 2.復(fù)蘇組和藥物組大鼠血清cTnI含量從ROSC后0.5h開始即明顯升高，并持續(xù)上升至24h達高峰，與對照組比較，各時間點血清cTnI含量均顯著增高(P<0.01)；與復(fù)蘇組比

5、較，藥物組ROSC后各時間點血清cTnI含量均顯著降低(P<0.01)。 3.復(fù)蘇組和藥物組腦含水量于ROSC后0.5h開始明顯升高，并持續(xù)上升至6h達高峰，12h、24h有所回落，與對照組比較，各時間點腦含水量均顯著增高(P<0.05或P<0.01)；與復(fù)蘇組比較，藥物組ROSC后12h、24h腦水含量顯著降低(P<0.05)。 4.復(fù)蘇組和藥物組血清S100B蛋白含量于ROSC后0.5h開始明顯升高，并持續(xù)上升至12

6、h達高峰，24h有所回落，與對照組比較，各時間點血清S100B蛋白含量均顯著增高(P<0.01)；與復(fù)蘇組比較，藥物組ROSC后6h、12h、24h血清S100B蛋白含量顯著降低(P<0.01)。 復(fù)蘇組和藥物組皮層S100B蛋白表達于ROSC后0.5h起開始明顯升高，并持續(xù)上升至12h達峰值，24h有所回落，與對照組比較，ROSC后各時間點皮層S100B蛋白表達均顯著增加(P<0.01)，與復(fù)蘇組比較，藥物組ROSC后各時間點

7、皮層S100B蛋白表達均顯著減少(P<0.05或P<0.01)。 5.復(fù)蘇組和藥物組ROSC后0.5h起血清NSE含量開始明顯升高，一直持續(xù)升高至24h達高峰，與對照組比較，各時間點血清NSE含量均顯著增高(P<0.05或P<0.01)；與復(fù)蘇組比較，藥物組ROSC后6h、12h、24h血清NSE含量均顯著降低(P<0.05或P<0.01)。 復(fù)蘇組和藥物組皮層NSE表達于ROSC后0.5h開始明顯升高，復(fù)蘇組持續(xù)上升至

8、6h～12h達高峰，藥物組持續(xù)上升至12h達高峰，24h均有所回落，與對照組比較，各時間點皮層NSE表達均顯著增加(P<0.05或P<0.01)：與復(fù)蘇組比較，藥物組ROSC后各時間點皮層NSE表達增加均更為顯著(P<0.05或P<0.01)。 6.復(fù)蘇組和藥物組血清HIF-1α含量子ROSC后3h開始明顯升高，并持續(xù)上升至24h達高峰，與對照組比較，ROSC后3h、6h、12h、24h血清HIF-1α含量均顯著增高(P<0.0

9、1)；與復(fù)蘇組比較，藥物組ROSC后6h、12h、24h血清HIF-1α含量顯著降低(P<0.05或P<0.01)。 復(fù)蘇組和藥物組皮層HIF-1α表達于ROSC后0.5h開始明顯增加，并持續(xù)上升至24h達高峰，與對照組比較，各時間點皮層HIF-1α表達均顯著增加(P<0.05或P<0.01)；與復(fù)蘇組比較，藥物組ROSC后6h、12h、24h皮層HIF-1α表達增加均更為顯著(P<0.05或P<0.01)。 7.復(fù)蘇組

10、和藥物組血清NGB含量于ROSC后3h開始明顯升高，并持續(xù)上升至24h達高峰，與對照組比較，ROSC后3h、6h、12h、24h血清NGB含量均顯著增高(P<0.01)；與復(fù)蘇組比較，藥物組ROSC后3h、6h、12h、24h血清NGB含量均顯著降低(P<0.05或P<0.01)。 復(fù)蘇組皮層NGB表達于ROSC后6h開始明顯升高，并持續(xù)上升至24h達高峰，與對照組比較，ROSC后6h、12h、24h皮層NGB表達均顯著增加(P

11、<0.01)；皮層NGB表達于ROSC后3h開始明顯升高，并持續(xù)升高至24h達高峰，與對照組比較，藥物組ROSC后3h、6h、12h、24h皮層NGB表達均顯著增加(P<0.05或P<0.01)；與復(fù)蘇組比較，藥物組ROSC后6h、12h、24h皮層NGB表達增加均更為顯著(P<0.05)。 8.病理改變：光鏡和電鏡下，對照組心肌和大腦皮層形態(tài)正常；復(fù)蘇組心肌組織和大腦皮層神經(jīng)細(xì)胞損傷改變較嚴(yán)重，藥物組病理損傷改變明顯減輕。