高壓電燒傷大鼠血清SOD、MDA的變化及烏司他丁的干預(yù)作用.pdf

1、目的：高壓電通過(guò)電熱效應(yīng)、電化學(xué)效應(yīng)及電場(chǎng)力等作用，對(duì)機(jī)體神經(jīng)、血管、肌肉等組織及器官造成損傷。高壓電燒傷致傷的病理及生理機(jī)制尚未完全明了。研究認(rèn)為，氧化應(yīng)激參與高壓電對(duì)機(jī)體的損傷過(guò)程。研究表明，燒傷后機(jī)體產(chǎn)生大量活性氧（reactive oxygen species，ROS），活性氧通過(guò)脂質(zhì)過(guò)氧化等反應(yīng)損傷組織和器官，并與炎癥因子和血管活性物質(zhì)協(xié)同作用，造成氧化應(yīng)激損傷。高壓電燒傷導(dǎo)致全身氧化應(yīng)激反應(yīng)的因素很多，其中血漿超氧化物歧化酶

2、（superoxide dismutase, SOD）、丙二醛（malondialdehyde, MDA）在調(diào)節(jié)氧化應(yīng)激方面有重要作用。SOD是廣泛存在于生物體的金屬氧化酶，能催化超氧陰離子自由基的歧化反應(yīng)，通過(guò)清除細(xì)胞產(chǎn)生的超氧離子而發(fā)揮作用。MDA是脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)的產(chǎn)物。目前，關(guān)于高壓電燒傷后大鼠血清SOD、MDA定量及定性變化的相關(guān)研究較少，本研究檢測(cè)高壓電燒傷大鼠血清SOD、MDA含量的變化，并采用烏司他?。║linastati

3、n，UTI）進(jìn)行干預(yù)，旨在探索大鼠高壓電燒傷后血清SOD、MDA的變化規(guī)律，證明氧化應(yīng)激在高壓電燒傷漸進(jìn)性損傷發(fā)生和發(fā)展過(guò)程中的作用，探索UTI對(duì)高壓電燒傷的治療效果。
　　方法：
　　1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組：本實(shí)驗(yàn)用成年SD大鼠240只，大鼠由河北醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供（合格證編號(hào)832457），體重291-362g，按隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)法將其隨機(jī)分為四組，每組60只，即假高壓電燒傷組（假傷組）、高壓電燒傷組（電傷組）、高壓電燒傷U

4、TI治療組（UTI組）、高壓電燒傷鹽水治療組（鹽水組）。按隨機(jī)數(shù)字表法，每組按觀察時(shí)相分為電傷前15min、電傷后5min、電傷后1h、2h、4h、8h六個(gè)時(shí)相組，每一時(shí)相組10只大鼠。
　　2.實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：①將實(shí)驗(yàn)大鼠稱(chēng)重并給予其編號(hào)登記；②準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)用采血管、采血針等物品，記錄實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)；③按藥品說(shuō)明配置實(shí)驗(yàn)藥品使其達(dá)到實(shí)驗(yàn)所需濃度。
　　3.高壓電燒傷動(dòng)物模型制備：用10％的水合氯醛（0.3ml/100g）溶液注入大鼠腹腔

5、以麻醉實(shí)驗(yàn)大鼠，待麻醉成功后，將麻醉后大鼠仰臥固定于專(zhuān)用的電擊實(shí)驗(yàn)臺(tái)上。大鼠左上肢及右下肢脫毛處理，大鼠的左上肢（電流入口）及右下肢（電流出口）分別連接1cm×1cm電極片。將實(shí)驗(yàn)變壓器和調(diào)壓器電線相連接；再接通電源，調(diào)節(jié)調(diào)壓器指針，將升壓器輸出電壓調(diào)至2kV，接通升壓器輸出電源開(kāi)關(guān)，使高壓電流通過(guò)大鼠致電擊，持續(xù)電擊3s，高壓電燒傷模型制作完成。將電傷后大鼠分籠放好，待采血。假傷組不予通電，其余處理步驟與電傷組及 UTI組的相同。鹽水

6、組電后5min內(nèi)注射生理鹽水5ml/kg至大鼠腹腔內(nèi)，UTI組電后5min內(nèi)注射 UTI（2ml/kg）至大鼠腹腔內(nèi)。每組樣品按時(shí)相進(jìn)行采血、分離血清。
　　4.標(biāo)本采集與保存：將高壓電燒傷大鼠再次麻醉，待麻醉后開(kāi)胸暴露心臟，于心臟內(nèi)直接抽血取樣，血量約6ml，將抽出的血液注入促凝管中，靜置30min，待血清析出后，放入離心機(jī)，調(diào)整轉(zhuǎn)速3000轉(zhuǎn)/min，離心10 min，取上清液置于Eppendorf管中于-70℃條件下保存。<

7、br>　　5.指標(biāo)檢測(cè)：采用酶聯(lián)免疫吸附雙抗體夾心法（enzyme linked immunosorbent assay, ELISA），分別檢測(cè)每組大鼠的六個(gè)時(shí)相組血清SOD、MDA含量。
　　6.實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)處理：采用SPSS21.0統(tǒng)計(jì)軟件，行兩因素析因設(shè)計(jì)的方差分析，多重比較采用LSD法t檢驗(yàn)。以P＜0.05為顯著性檢驗(yàn)水準(zhǔn)。
　　結(jié)果：
　　1.大鼠血清SOD含量變化
　　電傷組大鼠血清SOD含量與假傷組差

8、異有顯著性，總體低于假傷組（主效應(yīng)F＝165.245，P＜0.05）；電傷組血清SOD含量各時(shí)相變化差異有顯著性（主效應(yīng)F＝16.905，P＜0.05），傷后5min～8h各時(shí)相均低于本組傷前值（P＜0.05），且呈逐漸降低趨勢(shì)，SOD含量在8h時(shí)相時(shí)達(dá)到最低，但電傷組SOD含量仍較假傷組同時(shí)相低。
　　血清SOD含量UTI組與鹽水組差異有顯著性，總體高于鹽水組（主效應(yīng)F＝31.043，P＜0.05）；UTI組SOD含量各時(shí)相變化

9、差異有顯著性（主效應(yīng)F＝62.830，P＜0.05），UTI組SOD含量傷后5min～8h各時(shí)相均高于本組傷前值（P＜0.05），且呈逐漸降低趨勢(shì)。
　　2.大鼠血清MDA含量變化
　　電傷組血清MDA含量與假傷組差異有顯著性，總體高于假傷組（主效應(yīng)F＝1586.203，P＜0.05）；電傷組MDA含量各時(shí)相變化差異有顯著性（主效應(yīng)F＝126.552，P＜0.05），傷后5min～8h呈逐漸增高趨勢(shì)，且各時(shí)相均高于本組電傷前

10、值（P＜0.05）。
　　UTI組血清MDA含量與鹽水組差異有顯著性，總體低于鹽水組（主效應(yīng)F＝45.326，P＜0.05）；UTI組MDA含量各時(shí)相變化差異有顯著性（主效應(yīng)F＝246.201，P＜0.05），UTI組傷后5min～8h各時(shí)相均高于本組傷前值（P＜0.05），且呈逐漸增高趨勢(shì)。
　　結(jié)論：
　　高壓電燒傷使大鼠血清SOD含量降低、MDA含量升高，誘導(dǎo)高壓電燒傷后氧化應(yīng)激反應(yīng)。高壓電燒傷后采用UTI治療，