高壓電燒傷大鼠血小板膜糖蛋白GPⅠa-Ⅱa及GPⅣ的表達及己酮可可堿、烏司他丁干預作用.pdf

1、目的:電能作為一種清潔高效的能源，在人們生產生活中扮演著不可替代的角色。然而電力在給人們帶來方便的同時，電燒傷給人們帶來的傷害也不容忽視。特別是高壓電燒傷，具有病理機制復雜、對機體影響廣泛、并發(fā)癥多等特點。因此高壓電燒傷的治療一直以來都是困擾臨床醫(yī)生的一個難題。設計本實驗的目的就是為臨床治療提供一些參考資料，為高壓電燒傷患者的康復略盡綿薄之力。
　　通常，高壓電流進入機體，將沿電阻較小的血管走行，這一過程將造成血管壁損傷，膠原暴露

2、，血小板激活，血小板表面膜糖蛋白結構發(fā)生變化，導致血小板發(fā)生粘附、聚集、釋放等動作，產生微血栓。前期試驗已證明高壓電燒傷可使大鼠機體小板膜糖蛋白GPⅠb/Ⅸ/Ⅳ表達量降低、GPⅡ b/Ⅲa的表達量升高，血小板激活，血栓形成，血流緩慢，微循環(huán)障礙。己酮可可堿可降低血小板活化程度，改善微循環(huán)障礙。本次試驗通過建立高壓電擊傷大鼠實驗模型，進一步觀察高壓電流對血小板膜糖蛋白GPⅠa/Ⅱa及GPⅣ的影響及己酮可可堿(PTX)、烏司他丁(UTI)對

3、其干預效果。
　　方法:
　　1、實驗動物分組:將健康成年雄性SD大鼠（河北醫(yī)科大學實驗動物中心提供體重250-300g，證書編號:1411023）240只，應用隨機數(shù)表，根據(jù)隨機區(qū)組設計法將其中的240只平均分成四組，空白對照組，高壓電擊組、治療組1（烏司他丁組）、治療組2（己酮可可堿組），每組60只。再在每組中隨機分為電前15min(T0)、電后15min(T1)、電后1h(T2)、電后2h(T3)、電后4h(T4)、電

4、后8h(T5)，6個不同時相組，每組10只。各組分別編號，分籠飼養(yǎng)。
　　2、實驗前準備:按實驗要求，配置所需藥品，將大鼠稱重、標號，按順序記錄數(shù)據(jù)。
　　3、高壓電燒傷大鼠模型制備:連接好實驗設備，待用。用水合氯醛(0.3ml/100g)腹腔注射麻醉大鼠，麻醉成功后，將大鼠仰臥于電擊實驗臺上，左上肢及右下肢分別連接1cm×1cm電極片，左上肢為入口，右下肢為出口。連接電源，調整電壓為2kV，閉合實驗儀器回路，使大鼠經(jīng)受高壓

5、電擊3s。按照實驗要求，空白對照組只連電極片，給與假電，及生理鹽水5ml/kg;高壓電擊組電后給與生理鹽水5ml/kg;治療組1電后給與UTI，2萬單位/kg;治療組2電后給與1％PTX，5ml/kg。以上各組分別按時相取血，制備血清。
　　4、標本采集與保存:按照時相，將高壓電燒傷大鼠麻醉(水合氯醛0.3ml/100g)、固定于動物手術臺上、開胸、直視下心尖取血（3ml粉頭促凝管）。每只大鼠收集約6ml全血，靜置約30min，待

6、血清析出后，用離心機以3000轉/min離心約10min，取上層血清，置于2mlEppendorf管中，保存于-70℃冰箱中，待檢。
　　5、指標檢測:采用ELISA雙抗夾心法，分別檢測五組大鼠六個時相血清血小板膜糖蛋白GPⅠa/Ⅱa及GPⅣ的表達量的OD值，根據(jù)試劑盒說明將OD值換算成濃度值。
　　6、實驗數(shù)據(jù)處理:采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件對所得數(shù)據(jù)進行分析整理。實驗數(shù)據(jù)均采用均數(shù)±標準差（x±s）表示。采用兩因素析因

7、設計的方差分析，多重比較采用LSD-t檢驗，設定P＜0.05為顯著性差異。
　　結果:
　　1、血清GPⅠa/Ⅱa變化
　　1.1電傷組大鼠血清GPⅠa/Ⅱa總體含量高于空白對照組(P＜0.01)，且GPⅠa/Ⅱa含量隨傷后時間變化具有顯著差異(P＜0.01)，呈先增高后降低趨勢，在傷后2h達到高峰，隨后下降，但在8h時仍高于空白對照組(P＜0.01)。
　　1.2烏司他丁組大鼠血清GPⅠa/Ⅱa總體含量低于電傷

8、組(P＜0.01)，且烏司他丁組GPⅠa/Ⅱa含量在電傷后逐漸升高，在傷后2h達到高峰，以后逐漸下降，傷后15min～8h均低于電傷組，有顯著差別(P＜0.05)。
　　1.3己酮可可堿組大鼠血清GPⅠa/Ⅱa含量總體低于電傷組(P＜0.01)，且己酮可可堿血清GPⅠa/Ⅱa含量在電傷后變化較為復雜。電傷后15min～8h均低于電傷組，有顯著差別(P＜0.05)。
　　2、血漿GPⅣ變化
　　2.1電傷組大鼠血清 GP

9、Ⅳ總體含量高于空白對照組(P＜0.01)，且GPⅣ含量隨傷后時間變化具有顯著差異(P＜0.01)，呈先增高后降低趨勢，在傷后2h達到高峰，隨后下降，但在傷后8h時仍高于空白對照組(P＜0.01)。
　　2.2烏司他丁組大鼠血清 GPⅣ總體含量低于高壓電傷組(P＜0.01)，且烏司他丁組GPⅣ含量在電傷后逐漸升高，在傷后2h達到高峰，以后逐漸下降。電傷后15min～8h均低于電傷組，有顯著差別(P＜0.01)。
　　2.3己酮

10、可可堿組大鼠血清 GPⅣ含量總體低于電傷組(P＜0.01)，且己酮可可堿組血清GPⅣ含量在電傷后變化較為復雜。傷后15min～傷后2h低于電傷組(P＜0.01)，有顯著差異，在傷后4h與電傷組無顯著差異(P＜0.05)，在傷后8h低于電傷組，有顯著差異(P＜0.05)。
　　結論:
　　1、高壓電燒傷后血清GPⅠa/Ⅱa和GPⅣ均有不同程度增高，證明高壓燒傷可引起血小板活化，促進血栓形成，使機體處于高凝狀態(tài)。
　　2、