高壓電燒傷大鼠血清CD44、CD58變化及烏司他丁的干預(yù)作用.pdf

1、目的：高壓電燒傷除即刻性電熱損傷外，還存在著原因未明的漸進(jìn)性損傷。研究表明，微循環(huán)障礙在電燒傷后的漸進(jìn)性損傷發(fā)生和發(fā)展過程中起關(guān)鍵作用，并發(fā)現(xiàn)電傷后的微循環(huán)障礙主要由微血管損傷及微血流障礙所致。在影響微循環(huán)血流動(dòng)力學(xué)和流變學(xué)的指標(biāo)中，白細(xì)胞黏附、血小板聚集及血栓形成起重要作用。紅細(xì)胞是血液的主要組成成分，是影響微循環(huán)血流動(dòng)力學(xué)及流變學(xué)的關(guān)鍵因素。高壓電燒傷通過引起紅細(xì)胞聚集性升高及黏附性增加而加重微循環(huán)血流障礙，但紅細(xì)胞聚集和黏附的分子

2、機(jī)制目前尚不清楚。本研究通過檢測高壓電燒傷大鼠血清CD44、CD58兩種免疫黏附分子的變化，并通過烏司他丁(Ulinastatin，UTI)干預(yù)，旨在進(jìn)一步探索高壓電致紅細(xì)胞黏附及其免疫損傷的相關(guān)機(jī)制和干預(yù)辦法。
　　方法：
　　1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組：健康成年雄性SD大鼠(河北醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供，合格證編號(hào)832457)180只，按隨機(jī)數(shù)字表法分成三組，即假高壓電燒傷組(簡稱對(duì)照組)、高壓電燒傷組(簡稱電傷組)、高壓電燒傷

3、烏斯他丁(UTI)治療組(簡稱治療組)，每組各60只。每組又按觀察時(shí)間分為傷前15min、傷后5min、傷后1h、2h、4h、8h六個(gè)時(shí)相組，每組10只。
　　2.實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：將大鼠編號(hào)、稱重、左上肢、右上肢及前胸脫毛。按所需濃度配制實(shí)驗(yàn)藥品。
　　3.高壓電燒傷模型制作：連接實(shí)驗(yàn)變壓器和調(diào)壓器電線。用1％戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉大鼠(40mg/kg)，麻醉成功后，將大鼠仰臥于專用電擊實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，固定四肢，將兩個(gè)1cm×1 cm

4、電極片分別固定于大鼠的左上肢(電流入口)、右下肢(電流出口)脫毛區(qū)。接通電源，調(diào)整調(diào)壓器使升壓器輸出電壓至2千伏，連接升壓器輸出電源，使高壓電流通過大鼠，電擊時(shí)間為3s，對(duì)照組給予只連電線而不通電制作假電傷模型。電傷5min內(nèi)，治療組腹腔注射1％UTI(按2×104u/kg即2mL/kg給藥)，對(duì)照組及電傷組腹腔內(nèi)注射2mL/kg生理鹽水。
　　4.標(biāo)本采集與保存：將模型復(fù)制成功的大鼠開胸暴露心臟，直視下心臟抽血4mL，置于無菌塑

5、料試管中，靜置30min，待血清析出后上離心機(jī)，以3000轉(zhuǎn)/min離心10min，取上清液置于Eppendorf管中在-70℃條件下保存。
　　5.指標(biāo)檢測：采用酶聯(lián)免疫吸附劑測定(enzyme linked immunosorbentassay，ELISA)雙抗體夾心法，分別檢測每組大鼠六個(gè)時(shí)相組血清CD44、CD58含量。
　　6.實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)處理：采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件，行兩因素析因設(shè)計(jì)的方差分析，多重比較采用最小

6、顯著差異t檢驗(yàn)(LSD-t)。以p<0.05為顯著性檢驗(yàn)水準(zhǔn)。
　　結(jié)果：
　　1.大鼠血清CD44含量變化電傷組CD44含量總體高于對(duì)照組(主效應(yīng)F=882.901，P<0.01)；電傷組CD44含量受傷后時(shí)間變量影響(主效應(yīng)F=81.459，P<0.01)，傷后5min～8h各時(shí)相均高于本組傷前值(P<0.001)，且呈逐漸增高趨勢。
　　治療組CD44含量總體低于電傷組(主效應(yīng)F=219.597，P<0.01)；

7、治療組CD44含量受傷后時(shí)間變量影響(主效應(yīng)F=155.774，P<0.01)，治療組傷后5min～8h各時(shí)相均高于本組傷前值(P<0.001)。
　　2.大鼠血清CD58含量變化電傷組CD58含量總體高于對(duì)照組(主效應(yīng)F=121.598，P<0.01)；電傷組CD58含量受傷后時(shí)間變量影響(主效應(yīng)F=14.560，P<0.01)，傷后1～8h各時(shí)相均高于本組傷前值(P<0.001)，且呈逐漸增高趨勢。
　　治療組CD58含

8、量總體低于電傷組(主效應(yīng)F=189.815，P<0.01)；治療組CD58含量受傷后時(shí)間變化影響(主效應(yīng)F=11.854，P<0.01)，治療組傷后1～8h各時(shí)相均高于本組傷前值(P<0.001)。
　　結(jié)論：
　　1.高壓電燒傷可引起大鼠血清CD44含量升高，且在傷后8h內(nèi)呈逐漸升高趨勢。
　　2.高壓電燒傷可引起大鼠血清CD58含量升高，且在傷后8h內(nèi)呈逐漸升高趨勢。
　　3.高壓電通過刺激機(jī)體產(chǎn)生CD44、