電針協(xié)同BMSCs移植治療對(duì)腦出血大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響及機(jī)理研究.pdf

1、 目的：通過觀察 Morris 水迷宮測(cè)試成績(jī),血清中乙酰膽堿酯酶(AchE)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)含量和海馬突觸素(SYP)、神經(jīng)生長(zhǎng)相關(guān)蛋白-43(GAP-43)、突觸后致密物-95(PSD-95)蛋白表達(dá),探討Ea協(xié)同BMSCs移植治療對(duì)腦出血大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的療效及其可能的機(jī)制。方法：(1)將BMSCs復(fù)蘇、擴(kuò)增和誘導(dǎo),收集細(xì)胞備用。(2)選用成年SD大鼠進(jìn)行Morris水迷宮訓(xùn)練4天,每天進(jìn)行4次訓(xùn)練,

2、第5天進(jìn)行學(xué)習(xí)記憶能力測(cè)試,篩選逃避潛伏期少于30秒的大鼠隨機(jī)分為BMSCs組、Ea組、電Ea-BMSCs組、NS組、FO組和Normal組。(3)前4組采用膠原酶及肝素混合液勻速推進(jìn)尾殼核制備大鼠ICH模型,在術(shù)后第3天時(shí)分別通過移植BMSCs、電針刺激、移植BMSCs協(xié)同電針刺激和注射0.9%NS進(jìn)行治療,每組再分為1天、3天、5天、7天、14天五個(gè)亞組并給予對(duì)應(yīng)喂養(yǎng)天數(shù)；選取“大椎”與“百會(huì)”二穴進(jìn)行電針治療,每天只行一次治療。假

3、手術(shù)組僅進(jìn)針但不注入膠原酶和肝素,也不進(jìn)行治療；正常組不施加任何處理措施。(4)在相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)對(duì)各組實(shí)驗(yàn)大鼠進(jìn)行Morris水迷宮測(cè)試,然后取材。(5)檢測(cè)血清中AchE、SOD和MDA的含量,免疫組織化學(xué)檢測(cè)SYP、GAP-43和 PSD-95的表達(dá)。結(jié)果：(1)造模型之前對(duì)各組實(shí)驗(yàn)大鼠進(jìn)行水迷宮測(cè)試,各組間沒有檢測(cè)出統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。在腦出血治療后水迷宮檢測(cè),反映學(xué)習(xí)記憶能力的指標(biāo)隨時(shí)間延長(zhǎng)而好轉(zhuǎn),在1d時(shí)Ea組成績(jī)比其他組

4、好(P<0.05)；在3、5、7、14d時(shí),NS組成績(jī)比其他治療組差(3d時(shí)BMSCs組除外)(P<0.05), Ea-BMSCs組成績(jī)比Ea組和BMSCs組好(P<0.05)。(2)腦出血各組AchE在1d時(shí)開始下降,14d時(shí)達(dá)最低值。NS組AchE含量在5、7、14d時(shí)比其他治療組高(P<0.05)；Ea-BMSCs組AchE含量,在5d時(shí)比Ea組高(P<0.05), 在7、14d時(shí)比Ea組和BMSCs組低(P<0.05)。(3)腦

5、出血各組血清SOD在1d時(shí)開始下降,在3d時(shí)達(dá)最低后快速上升,持續(xù)到14d達(dá)峰值。在3d時(shí),Ea組SOD含量比其他治療組高(P<0.05)。NS組SOD含量在5、7、14d時(shí)比其他治療組低 (P<0.05),Ea-BMSCs組SOD含量在7、14d時(shí)比Ea組和BMSCs組高 (P<0.05),BMSCs組SOD含量在5d時(shí)比Ea組低(P<0.05)。(4)腦出血各組血清MDA含量在1d時(shí)開始上升, 在3d時(shí)達(dá)峰值后下降,在14d時(shí)達(dá)最低

6、值。在3d時(shí),Ea組MDA含量比其他治療組低(P<0.05)。在5、7、14d時(shí), NS 組 MDA 含量比其他治療組高 (P<0.05),Ea-BMSCs 組 MDA 含量比Ea組和BMSCs組低(P<0.05)。(5)腦出血各組SYP、PSD-95表達(dá)在1d時(shí)開始上升,Ea-BMSCs組和BMSCs組持續(xù)增高到14d達(dá)峰值,Ea組和NS組上升到7d時(shí)達(dá)峰值,隨后下降。腦出血各組GAP-43表達(dá)在1d時(shí)開始上升,7d時(shí)達(dá)峰值,隨后下降

7、。(6)在5、7、14d時(shí), NS組SYP、GAP-43表達(dá)比其他治療組低 (P<0.05),Ea-BMSCs組SYP、GAP-43表達(dá)比Ea組和BMSCs組高(P<0.05)。(7)在3、5d時(shí),Ea組PSD-95表達(dá)比其他治療組高(P<0.05)。NS組PSD-95表達(dá)在5、7、14d時(shí)比其他治療組低 (P<0.05)。Ea-BMSCs組PSD-95的表達(dá)在7d、14d時(shí)比Ea組和BMSCs組高(P<0.05)。(8)在腦出血治療1

8、4d時(shí),各治療組的SOD、SYP 、PSD-95 、MDA、AchE、GAP-43、學(xué)習(xí)記憶能力與FO組和Normal組相比較仍有明顯差異(P<0.05)。 結(jié)論：(1)電針和BMSCs移植協(xié)同治療ICH,與單一電針治療或單一BMSCs移植治療比較,能顯著提高學(xué)習(xí)記憶能力,其機(jī)制可能與降低血清中AchE含量和上調(diào)SYP、PSD-95及GAP-43表達(dá)有關(guān)。(2)電針和BMSCs移植協(xié)同治療ICH,能顯著增加血清中SOD活力,減少M(fèi)DA的