2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:
  干細(xì)胞作為可能治療出血性腦卒中的方法之一,早期動物實驗證實神經(jīng)干細(xì)胞移植可產(chǎn)生腦保護(hù)性作用,促進(jìn)神經(jīng)功能恢復(fù),參與免疫調(diào)節(jié),但其移植治療的最佳時間窗尚不清楚,還存在較大爭議。因此,本研究探討神經(jīng)干細(xì)胞(Neural stem cells,NSCs)早期原位移植入腦出血大鼠模型的最佳時間點(diǎn)。
  方法:
  (1)模型制作:選擇年輕雄性Sprague Dawley(SD)大鼠(280-320g)作為模型動物,

2、利用腦立體定向儀向大鼠尾狀核注射Ⅳ型膠原酶建立腦出血模型。主要從以下三個方面來評價模型的穩(wěn)定性:腦組織解剖標(biāo)本冠狀面切片、MRI檢查、神經(jīng)功能行為學(xué)。解剖標(biāo)本和MRI檢查評價血腫的位置、大小和形態(tài),神經(jīng)功能行為學(xué)評價大鼠神經(jīng)功能缺損的程度。
  (2)NSCs培養(yǎng):鼠胚胎源性神經(jīng)干細(xì)胞原代購于廣州賽業(yè)公司,培養(yǎng)傳代,利用相差顯微鏡觀察神經(jīng)干細(xì)胞的生長和分化形態(tài),并行nestin免疫熒光染色鑒定神經(jīng)干細(xì)胞,用map2標(biāo)記神經(jīng)元及GF

3、AP標(biāo)記星形膠質(zhì)細(xì)胞來鑒定神經(jīng)干細(xì)胞的分化能力。
  (3)實驗分組:A組單純腦出血組空白對照組(ICH+PBS), B組神經(jīng)干細(xì)胞移植對照組(SHAM組SHAM),C組神經(jīng)干細(xì)胞移植組(ICH+GFP-NSCs):分別在腦出血后3小時、1天、3天、5天、7天移植神經(jīng)干細(xì)胞。
  (4)行為學(xué):觀察神經(jīng)干細(xì)胞移植對腦出血大鼠的神經(jīng)功能恢復(fù)的影響。
  (5)免疫熒光:應(yīng)用免疫熒光技術(shù)觀察神經(jīng)干細(xì)胞在腦出血大鼠腦內(nèi)NSC

4、移植前后的存活情況。
  (6)ELASA:應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELASA)檢測腦出血和神經(jīng)干細(xì)胞移植后大鼠腦組織中相關(guān)細(xì)胞因子(bFGF、EGF、VEGF)的變化。
  結(jié)果:
  (1)Ⅳ膠原酶建立的腦出血模型腦內(nèi)血腫形態(tài)規(guī)則,血腫大小穩(wěn)定,邊界清楚,對側(cè)肢體功能障礙明顯。
  (2)神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)過程中,增殖形成大量的神經(jīng)球,nestin染色陽性證實為神經(jīng)干細(xì)胞,經(jīng)誘導(dǎo)分化后MAP-2和GFAP染色陽性,

5、表明神經(jīng)干細(xì)胞可進(jìn)一步分化為神經(jīng)元或神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞。
  (3)神經(jīng)干細(xì)胞移植治療腦出血大鼠后,可以促進(jìn)大鼠神經(jīng)功能缺損的恢復(fù),以3天移植改善最為顯著。
  (4)神經(jīng)干細(xì)胞原位移植治療腦出血大鼠,14天時,在顱內(nèi)可以檢測到存活的GFP-NSCs,其中3天移植組和5天移植組中,GFP-NSCs在形態(tài)上、數(shù)量上明顯占優(yōu)勢。
  (5)GFP-NSCs原位移植增加了腦組織中大鼠堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)、大鼠表皮生長

6、因子(EGF)、大鼠血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)的表達(dá),其中3天移植治療組中, bFGF、EGF的表達(dá)顯著多于其他移植治療組,VEGF的表達(dá)在各治療組中無明顯差異。
  (6)GFP-NSCs原位移植增加了腦組織中大鼠神經(jīng)生長因子(NGF)、大鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)、大鼠睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(CNTF)、大鼠膠質(zhì)細(xì)胞系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)的表達(dá),其中3天移植組中,上述四個神經(jīng)營養(yǎng)因子的表達(dá)水平顯著高于其他4個移植治

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