BMSCs移植治療腦出血損傷大鼠的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、分類號(hào)：R742密級(jí)：學(xué)位類別：科學(xué)學(xué)位口專業(yè)學(xué)位團(tuán)學(xué)校代碼：10062學(xué)號(hào)：2010602735學(xué)科門類：醫(yī)學(xué)又肄簣科矢普零季裁樹(shù)Ji鞫MEDIe矗L0鞫lVERSllY碩士學(xué)位論文MASTER’SDISSERTATIoN論文題目：BMSCs移植治療腦出血損傷大鼠的實(shí)驗(yàn)研究TITLEHumanumbilicalcordmesenchymalstemcellsTransplantationfortreatmentofcerebralhe

2、morrhageinjuryinrats一級(jí)學(xué)科：臨床醫(yī)學(xué)二級(jí)學(xué)科：神經(jīng)病學(xué)論文作者：杜從斌指導(dǎo)教師：王世民導(dǎo)師組成員：閻曉玲蘇心韓彤王新平天津醫(yī)科大學(xué)研究生院二。一三年五月天津醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文中文摘要目的：研究BMSCs移植對(duì)大鼠出血性腦損傷后神經(jīng)功能恢復(fù)的影響，并探討其可能的治療機(jī)制。方法：采用密度梯度離心法結(jié)合貼壁篩選法分離綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因大鼠BMSCs。采用向成年雄性SD大鼠右側(cè)蒼白球立體定向注射膠原酶的方法誘導(dǎo)腦出血?jiǎng)游?/p>

3、模型，將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物隨機(jī)分為鹽水組、模型組與移植組，模型組、移植組右側(cè)蒼白球各注射2ul用無(wú)菌生理鹽水稀釋的Ⅶ膠原酶，鹽水組注射等量生理鹽水。移植組造模后2h采用同樣方法移植BMSCs，鹽水組及模型組大鼠不做處理。采用mNSS神經(jīng)功能損傷程度評(píng)分法檢測(cè)大鼠神經(jīng)系統(tǒng)功能恢復(fù)情況，Morris水迷宮觀察比較大鼠移植前后的行為學(xué)變化，核磁共振掃描觀察大鼠移植后腦組織影像學(xué)改變。造模后1d、3d、7d、14d和28d處死大鼠，通過(guò)免疫組織化學(xué)法和E

4、LLISA法，觀察移植后的BMSCs在大鼠腦內(nèi)存活、分化情況和炎性因子、神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子等指標(biāo)變化，以及對(duì)細(xì)胞凋亡的影響。結(jié)果：1通過(guò)密度梯度離心法結(jié)合貼壁篩選法分離大鼠BMSCs，經(jīng)流式細(xì)胞儀檢測(cè)所分離出的細(xì)胞，結(jié)果顯示細(xì)胞表達(dá)CD90和CD29，符合BMSCs的形態(tài)及細(xì)胞表面標(biāo)志物等特性，并且可在體外進(jìn)行分化、傳代、擴(kuò)增，具有良好的自我更新能力和多向分化潛能，證實(shí)分離所得細(xì)胞為BMSCs；2，采用向大鼠右側(cè)蒼白球立體定向注射膠原酶的方法

5、誘導(dǎo)腦出血?jiǎng)游锬Ｐ停笫笊窠?jīng)功能缺損明顯，造模后6h行MRI檢查，T1WI序列顯示右側(cè)紋狀體相應(yīng)層面小片狀低密度影，證實(shí)造模成功。3BMSCs移植后第1、3、7、14和28天，移植組mNSS評(píng)分低于模型組。4移植組大鼠TNFa表達(dá)和細(xì)胞凋亡水平均顯著降低，而B(niǎo)DNF蛋白的表達(dá)則顯著提高，腦組織可見(jiàn)極少量GFPNeuN、GFPGFAP陽(yáng)性細(xì)胞。結(jié)論：(1)BMSCs可以在體外分離、培養(yǎng)、傳代、擴(kuò)增。(2)采用SD大鼠右側(cè)蒼白球立體定向注射