牛初乳對(duì)小鼠淋巴細(xì)胞的影響.pdf

1、目的：近幾年，人們對(duì)于牛初乳的免疫調(diào)節(jié)作用進(jìn)行了大量的研究，但多數(shù)研究方法簡單，可信度不強(qiáng)。利用現(xiàn)代免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)及設(shè)備對(duì)牛初乳的免疫調(diào)節(jié)作用進(jìn)行深入、細(xì)致、客觀的研究，驗(yàn)證牛初乳的免疫調(diào)節(jié)功效性，這必將對(duì)牛初乳保健食品的開發(fā)，以至于整個(gè)乳業(yè)的發(fā)展具有重要的意義。本實(shí)驗(yàn)正是將流式細(xì)胞術(shù)、單克隆抗體技術(shù)、細(xì)胞熒光化學(xué)技術(shù)相結(jié)合，并利用抗原抗體結(jié)合原理，采用流式細(xì)胞儀檢測了小鼠外周血的T淋巴細(xì)胞亞群和B淋巴細(xì)胞；同時(shí)采用瓊脂糖凝膠電泳技術(shù)檢

2、測了牛初乳對(duì)小鼠胸腺細(xì)胞凋亡的影響。從而在免疫細(xì)胞數(shù)量和免疫器官細(xì)胞凋亡兩個(gè)方面評(píng)價(jià)了牛初乳的免疫調(diào)節(jié)作用。 方法：本實(shí)驗(yàn)取雄性昆明小鼠40只，隨機(jī)分為4組，每組10只。按牛初乳粉人體推薦攝入量2g/日/60Kg等效劑量的1、10、20倍設(shè)低劑量組、中劑量組、高劑量組和一個(gè)對(duì)照組。低、中、高3個(gè)劑量組灌服牛初乳，對(duì)照組灌服等量的生理鹽水，連續(xù)灌胃30天。在末次灌胃24小時(shí)后，每組隨機(jī)取8只小鼠，眼球取外周血，樣品經(jīng)處理后上機(jī)進(jìn)行

3、檢測。主要檢測指標(biāo)包括輔助性T淋巴細(xì)胞(Th)、抑制性T淋巴細(xì)胞(Ts)、B淋巴細(xì)胞，同時(shí)檢測了小鼠30天的增重、胸腺指數(shù)和脾指數(shù)。另取40只雄性昆明小鼠，隨即分為5組，每組8只。同樣按牛初乳粉人體推薦攝入量2g/日/60Kg等效劑量的1、10、20倍設(shè)低劑量組、中劑量組、高劑量組及陰性對(duì)照組和陽性對(duì)照組。低、中、高3個(gè)劑量組灌服牛初乳，對(duì)照組灌服等量的生理鹽水，連續(xù)灌胃15天。在末次灌胃12h后，每組隨機(jī)取5只小鼠，除陰性對(duì)照組外，其

4、余各組小鼠腹腔注射地塞米松25mg/kg，16小時(shí)后處死小鼠，取胸腺，瓊脂糖凝膠電泳檢測細(xì)胞凋亡。 結(jié)果：(1)Th細(xì)胞數(shù)量各組間差異不顯著(P＞0.05)；各組間Ts細(xì)胞的數(shù)量差異亦不顯著(P＞0.05)；中劑量組的總T細(xì)胞數(shù)量與其它各組比較明顯增多，與對(duì)照組比較差異顯著(P＜0.05)(2)中劑量組B細(xì)胞數(shù)量明顯降低，與其它各組比較差異顯著(P＜0.05)。(3)低劑量組的體重增加高于其它各組，但增加幅度不大，各組間差異不顯

5、著(P＞0.05)；(4)胸腺指數(shù)各組間差異不顯著(P＞0.05)；中劑量組小鼠的脾臟指數(shù)明顯降低，與其它各組間差異顯著(P＜0.05)。(5)注射地塞米松后小鼠胸腺細(xì)胞DNA出現(xiàn)梯形條帶，灌服牛初乳的各劑量組與陽性對(duì)照組比較沒有顯著區(qū)別，而陰性對(duì)照組DNA聚集在加樣孔附近，沒有出現(xiàn)梯形條帶。 結(jié)論：(1)中劑量組的總T細(xì)胞百分比數(shù)量顯著增加，與對(duì)照組比較差異顯著，說明中劑量組小鼠的細(xì)胞免疫有所增強(qiáng)。(2)中劑量組小鼠的B細(xì)胞百

6、分比數(shù)量明顯降低，但是T細(xì)胞、B細(xì)胞、和NK細(xì)胞百分比總和應(yīng)等于100％的淋巴細(xì)胞，由于人和鼠的NK細(xì)胞很少，因此中劑量組的T細(xì)胞百分?jǐn)?shù)增多，B細(xì)胞百分?jǐn)?shù)必然降低。同時(shí)由于免疫的復(fù)雜性以及B細(xì)胞發(fā)揮體液免疫的功能在于其分泌的抗體，因此，B細(xì)胞百分比的下降并不能說明其體液免疫有所下降。(3)沒有發(fā)現(xiàn)小鼠灌食牛初乳后對(duì)體重的增加有影響。(4)灌服牛初乳對(duì)小鼠的胸腺指數(shù)沒有影響，但是中劑量組的脾指數(shù)明顯下降，與其它各組差異顯著，這是否與中劑量