抗FAS核酶對COPD小鼠T淋巴細(xì)胞凋亡的影響.pdf

1、目的：研究抗Fas錘頭狀核酶對COPD模型小鼠T淋巴細(xì)胞Fas的表達(dá)及其凋亡的影響，觀察T淋巴細(xì)胞亞群的變化。
　　方法：雄性6周齡清潔級(jí)小鼠60只，適應(yīng)性飼養(yǎng)2周后，隨機(jī)分為COPD組（50只）、健康對照組（10只）。采用煙霧暴露法進(jìn)行COPD小鼠造模，通過小鼠肺功能檢查及肺組織病理HE染色對COPD小鼠模型進(jìn)行評(píng)估。造模成功后將COPD小鼠隨機(jī)分為：A組（COPD組）、B組（空轉(zhuǎn)染組）、C組（抗Fas核酶轉(zhuǎn)染組）、D組（突變核

2、酶轉(zhuǎn)染組），對 B、C、D小鼠脾臟 T淋巴細(xì)胞分別進(jìn)行慢病毒包裝的空轉(zhuǎn)染、FAS核酶轉(zhuǎn)染、突變核酶轉(zhuǎn)染；通過RT-PCR、Western blot對4組T淋巴細(xì)胞進(jìn)行Fas mRNA及Fas蛋白表達(dá)的檢測，用流式細(xì)胞術(shù)檢測CD4＋T淋巴細(xì)胞凋亡水平及CD4＋/CD8＋比值。
　　結(jié)果：（1）通過肺功能檢查及肺組織病理 HE染色進(jìn)行模型評(píng)估，結(jié)果顯示，與健康對照組相比，COPD小鼠動(dòng)態(tài)肺順應(yīng)性及呼氣峰流速降低，氣道阻力升高，有統(tǒng)計(jì)學(xué)

3、意義，P＜0.01，并且肺組織病理切片可見肺氣腫的形成和慢性炎癥細(xì)胞浸潤，證明COPD小鼠模型是構(gòu)建成功的。（2）與A組比較，B組Fas mRNA及Fas蛋白表達(dá)水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＞0.05。C組和D組Fas mRNA及Fas蛋白表達(dá)水平降低，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＜0.05。并且C組與D組相比，C組Fas mRNA及Fas蛋白表達(dá)更低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＜0.05。（3）與A組比較，B組CD4＋T淋巴細(xì)胞凋亡率及CD4＋/CD8＋比

4、值的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＞0.05。C組和D組CD4＋T淋巴細(xì)胞凋亡率降低、CD4＋/CD8＋比值升高，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＜0.05。并且C組與D組相比， C組CD4＋T淋巴細(xì)胞凋亡率更低、CD4＋/CD8＋比值更高，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＜0.05。
　　結(jié)論：COPD小鼠T淋巴細(xì)胞經(jīng)過抗Fas核酶干預(yù)，可以有效抑制COPD小鼠T淋巴細(xì)胞的Fas mRNA及Fas蛋白的表達(dá)，降低COPD小鼠CD4+T淋巴細(xì)胞凋亡率，使CD4+/CD8+