新型多肽神經(jīng)組織工程支架與背根神經(jīng)節(jié)聯(lián)合培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：通過自組裝IKVAV 多肽納米支架材料與鼠背根神經(jīng)節(jié)（Dorsal Root Ganglion,DRG）聯(lián)合培養(yǎng)，觀察其對DRG 及其神經(jīng)元細(xì)胞(Dorsal Root Ganglion Neurons,DRGn)的生物學(xué)作用。 方法：IKVAV 多肽兩親分子委托上海波泰生物科技公司合成。在IKVAV 多肽溶于NaOH 溶液中，調(diào)整PH 至8.5，濃度為1wt％(0.01mg/ul)，加DMEM/F12 在蓋玻片上觸發(fā)多肽

2、自組裝為凝膠，透射電鏡檢測。取新生SD 大鼠DRG 及DRGn 分為實(shí)驗(yàn)組與對照組，實(shí)驗(yàn)組中背根神經(jīng)節(jié)及其游離細(xì)胞接種于二維凝膠表面，對照組接種于多聚賴氨酸表面。倒置相差顯微鏡觀察DRG生長情況，免疫熒光染色結(jié)合鏡下細(xì)胞計數(shù)檢測凝膠材料的細(xì)胞毒性和對神經(jīng)組織及細(xì)胞的粘附性。觀察DRGn的存活和軸突生長情況，并行統(tǒng)計學(xué)分析。 結(jié)果：透射電鏡示：自組裝凝膠為編織狀納米纖維。實(shí)驗(yàn)組中DRG 軸突生長情況優(yōu)于對照組。培養(yǎng)1、3d 后，兩

3、組中活細(xì)胞比例均無顯著性差異。培養(yǎng)3、12h 后，實(shí)驗(yàn)組中神經(jīng)細(xì)胞粘附數(shù)顯著高于對照組。實(shí)驗(yàn)組和對照組中DRGn 培養(yǎng)1天后平均軸突長度分別為43.8±10.4μm、33.4±5.75μm 。培養(yǎng)14天后實(shí)驗(yàn)組和對照組中DRGn數(shù)目分別為36.50±1.78/視野、19.70±3.71/視野，神經(jīng)元所占比例分別為43.60±4.83％、26.97±4.90％。 結(jié)論：含IKVAV 多肽凝膠材料能促進(jìn)DRG生長和DRGn 粘附，對