TREM-1、TNF-α及sTNFRⅠ在子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)病機(jī)制中的作用.pdf

1、第一部分TREM-1在子宮內(nèi)膜異位癥中的表達(dá)研究髓樣細(xì)胞觸發(fā)受體(triggering receptor expressed on myeloidcells，TREM-1)在子宮內(nèi)膜異位癥(Endometriosis，EMS)中的表達(dá)和作用。 方法： 應(yīng)用實(shí)時(shí)定量RT-PCR的方法檢測(cè)子宮內(nèi)膜異位癥病人及正常對(duì)照組的外周血白細(xì)胞膜的TREM-1的mRNA表達(dá)，以β-actin為內(nèi)參照；同時(shí)收集子宮內(nèi)膜異位癥病人及正常婦女

2、對(duì)照的血清及腹腔液，應(yīng)用ELISA檢測(cè)其中可溶性TREM-1(soluble triggering receptorexpressed on myeloid cells，sTREM-1)的水平；應(yīng)用免疫組化的方法，觀察TREM-1在子宮內(nèi)膜異位癥病人異位內(nèi)膜的表達(dá)。 結(jié)果： EMS組β-actin與TREM-1ct值的比值為0.7650±0.02204，正常對(duì)照組β-actin與TREM-1 ct值的比值為0.6989±

3、0.03625，在EMS組中，TREM-1mRNA表達(dá)明顯高于對(duì)照組(p<0.05)。EMS組血清中sTREM-1的濃度N22.16±5.37 ng/ml，正常對(duì)照組的濃度為9.78±0.84ng/ml，EMS組腹腔液中sTREM-1的水平為33.604±5.137 ng/ml，正常對(duì)照組的水平為14.598±3.127 ng/ml。EMS組血清中sTREM-1的水平明顯高于正常對(duì)照血清，在腹腔液中也是如此，均具有顯著差異(p<0.01

4、)，而且兩組腹腔液中的濃度均明顯高于血清中的濃度(p<0.05)。在子宮內(nèi)膜異位癥病人的異位內(nèi)膜中，免疫組化也證實(shí)未見TREM-1的表達(dá)。 結(jié)論： 在EMS的血清及腹腔液中sTREM-1的水平明顯升高，他主要來源于子宮內(nèi)膜異位癥病人的外周血白細(xì)胞TREM-1高表達(dá)，這些白細(xì)胞在移行到腹膜腔后分泌大量的可溶性TREM-1，可能在子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)生發(fā)展過程中具有重要的作用。 第二部分TNF-α及sTNFRⅠ對(duì)子宮內(nèi)

5、膜異位癥在位內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞的作用 目的： 探討腫瘤壞死因子α(tumor necrosis factor，TNF-α)和可溶性腫瘤壞死因子受體(soluble TNF-α receptor Ⅰ，sTNFR Ⅰ)對(duì)體外培養(yǎng)的EMS患者在位內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞的影響，為子宮內(nèi)膜異位癥的生物學(xué)治療提供新思路。 方法： 對(duì)EMS患者的在位子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng)，分別用不同濃度的TNF-α(0、0.1、1、10和100

6、 ng/ml)或者同一濃度TNF-α(1 ng/ml)培養(yǎng)不同時(shí)間(4、8、12、24、48和72 h)或者TNF-α(1ng/ml)和sTNFR Ⅰ(2 ug/ml)對(duì)基質(zhì)細(xì)胞進(jìn)行刺激并收集細(xì)胞上清液，利用雙抗體夾心ELISA檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)上清液中白細(xì)胞介素6(interleukin-6，IL-6)、基質(zhì)金屬蛋白酶-3(matrix metalloproteinases-3，MMP-3)的水平。 結(jié)果： TNF-α可促進(jìn)