MKP-1在子宮內膜異位癥發(fā)病機制中的作用研究.pdf

1、研究目的：研究絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1（MKP-1）在子宮內膜異位癥（內異癥）發(fā)病機制中的作用。
　　方法：收集內異癥患者和輸卵管性不孕患者內膜組織（對照組），分別通過實時熒光定量聚合酶鏈式反應（Real-time PCR）、蛋白免疫印跡（Western blot）以及免疫組化（IHC）等實驗方法從基因轉錄水平（mRNA）和蛋白水平分析MKP-1在內異癥患者異位內膜、在位內膜以及對照組子宮內膜中的表達情況；分離并培養(yǎng)異位子宮內

2、膜間質細胞（ESCs），通過Small interfering RNA（siRNA）干擾技術沉默MKP-1，研究MKP-1對ESCs遷移、增殖的影響，分析IL-4、IL-6、COX-2以及VEGF等相關基因的表達是否因MKP-1的沉默而發(fā)生改變；分離并培養(yǎng)內異癥患者子宮內膜在位間質細胞(以下簡稱為EESCs)，分別予以雌激素與脂氧素刺激，檢測細胞中MKP-1的表達變化，分析MKP-1是否參與雌激素和炎癥反應對內異癥的調控。
　　結

3、果：MKP-1在內異癥以及對照組中的表達：MKP-1在內異癥患者的異位內膜、在位內膜以及對照組中的表達呈現(xiàn)依次遞減的趨勢。內異癥患者的異位內膜中表達最高，與對照組比較，差異具有極顯著統(tǒng)計學意義(*** P＜0.0001)，內異癥患者的在位內膜高于對照組正常內膜，差異具有統(tǒng)計學意義(* P＜0.05)，但內異癥患者自身配對的在位內膜與異位內膜比較，差異無統(tǒng)計學意義(P=0.4861)。MKP-1對異位子宮內膜間質細胞生物學行為的影響：（1

4、）MKP-1沉默抑制ESCs增殖。（2）MKP-1沉默促進ESCs的遷移。同時，MKP-1沉默誘導IL-4基因的表達，其表達水平顯著高于對照組（** P＜0.01，）。MKP-1沉默抑制IL-6的表達、促進了COX-2和VEGF的表達，但數(shù)據(jù)沒有統(tǒng)計學差異。雌激素及脂氧素調節(jié)EESCs中MKP-1的表達：（1）雌激素促進EESCs表達MKP-1（2）脂氧素促進EESCs表達MKP-1。
　　結論：臨床樣品分析表明MKP-1在內異癥