牙根種植結(jié)合磷酸三鈣-富含血小板血漿復(fù)合移植增高牙槽嵴的初步研究.pdf

1、目的:①由自體血液提取富含血小板的血漿(platelet-rich plasma,PRP),誘導(dǎo)體外培養(yǎng)的骨髓基質(zhì)細(xì)胞(bone marrow stromal cell,BMSCs)向成骨細(xì)胞分化,初步鑒定PRP對(duì)BMSCs的骨誘導(dǎo)作用.②探討磷酸三鈣/富含血小板血漿(TCP/PRP)復(fù)合材料的骨修復(fù)能力,希望獲得一種更理想的骨移植材料.③評(píng)價(jià)牙根種植結(jié)合磷酸三鈣/富含血小板血漿、引導(dǎo)骨再生術(shù)(guided bone regenerat

2、ion,GBR)復(fù)合移植增高牙槽嵴的效果,探索牙槽嵴增高術(shù)(alveolar ridge augmentation,ARA)的新方法新理念,為臨床應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)和實(shí)驗(yàn)依據(jù).材料與方法:①抽取狗髂骨骨髓體外分離培養(yǎng)獲得BMSCs,含有小牛血清的DMEM培養(yǎng)基進(jìn)行原代培養(yǎng).抽取上述狗自體靜脈血,分離濃縮血小板,獲得PRP.BMSCs傳代培養(yǎng)中加入PRP 10ml/L進(jìn)行誘導(dǎo)分化,用倒置相差顯微鏡進(jìn)行細(xì)胞形態(tài)學(xué)和細(xì)胞生長情況觀察,透射電鏡觀

3、察細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)改變,應(yīng)用流式細(xì)胞儀(FCM)定期測(cè)量BMSCs內(nèi)各周期DNA含量,了解PRP對(duì)骨髓基質(zhì)細(xì)胞增殖、分化及細(xì)胞合成方面的影響.茜素紅染色法檢測(cè)體外礦化結(jié)節(jié),細(xì)胞堿性磷酸酶染色(alkalinephosphate,ALP)和骨鈣素(OC)含量測(cè)定,檢測(cè)PRP對(duì)BMSCs的骨誘導(dǎo)作用.②按設(shè)計(jì)牙位拔雙側(cè)上、下頜前磨牙,去骨,建立局部牙槽嵴萎縮模型.③建模4周后,牙根種植結(jié)合磷酸三鈣/富含血小板血漿復(fù)合移植到實(shí)驗(yàn)性牙槽嵴萎縮處,

4、并覆蓋聚四氟乙烯膜(polytetrafluoroethylene,PTFE).實(shí)驗(yàn)分組:實(shí)驗(yàn)組:牙根+TCP/PRP/PTFE;對(duì)照組:牙根+TCP/PTFE.④分別于6周、12周處死動(dòng)物取材,組織切片染色,分析各組牙槽骨再生情況,觀察牙根與骨組織接觸情況,測(cè)量牙槽嵴增加的高度和寬度.結(jié)論:①RPR能夠促進(jìn)骨髓基質(zhì)細(xì)胞DNA合成,增強(qiáng)其ALP活性表達(dá),刺激骨鈣素分泌,誘導(dǎo)其向成骨細(xì)胞分化,具有骨誘導(dǎo)作用.②TCP/PRP復(fù)合材料可以修