貧血小板血漿和根面脫礦對人牙周細(xì)胞在病變牙根面附著和增殖的影響.pdf

1、遵義醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文貧血小板血漿和根面脫礦對人牙周細(xì)胞在病變牙根面附著和增殖的影響姓名：張海燕申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：口腔內(nèi)科指導(dǎo)教師：劉琪20050401遵義醫(yī)學(xué)院碩士研究生畢業(yè)論文貧血小板血漿和根面脫礦對人牙周細(xì)胞在病變牙根面附著和增殖的影響研究生張海燕 導(dǎo)師 劉琪摘 要目的：觀察貧血小板血漿( P l a t e l e t ．p o o rp l a s m a ，P P P ) 和根面脫礦單獨(dú)及聯(lián)合應(yīng)用對人牙齦成纖維細(xì)胞(

2、H u m a n g i n g i v a lf i b r o b l a s t s ，H G F s ) 、牙周膜成纖維細(xì)胞( H u m a n p e r i o d o n t a l l i g a m e n t f i b r o b l a s t s ，H P D L F s )和牙槽骨細(xì)胞( H u m a n a l v e o l a Tb o n ec e l l S ，H A B C s ) 在病變矛

3、根面的附著及增殖的影響，同時(shí)，觀察附著于經(jīng)不同處理的瘸變牙根表面的這三種牙周細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)，探討P P P 和根面脫礦處理在促牙周組織再生中的可能作用。 方法：采用組織塊培養(yǎng)法進(jìn)行H G F s 、H P D L s 和H A B C s的體外培養(yǎng)；P P P 是從人新鮮全血中應(yīng)用梯度密度二步離心法獲取，新鮮全血( 已加入抗凝劑) 第～次離心( 1 3 0 0 r ／m i n ) 1 0 分鐘，吸取全部上清液及交界面以下1 ～2 m

4、m 的沉淀部分移至另一離心管，棄去下層的血細(xì)胞，再次離心( 2 0 0 0 r ／m i n ) 1 0 分鐘取上層即為P P P ； 病變牙根片的制備是選取因重度牙周病拔除的病牙，拔除靜用鉛筆在根表面標(biāo)記出牙周袋累及的范圍，然后用刮治器刮凈病牙根面上殘留的組織，并在冷蒸餾水水冷卻的條件下用金剛砂片將牙根磨成4 X 4 X l m m 3 大小( 只磨除牙本質(zhì)側(cè)，牙骨質(zhì)側(cè)不磨) 的根片，收集的根片經(jīng)高壓滅菌處理后留存待用。經(jīng)P P P

5、和E D T A ( 2 4 ％，p H = 6 ．7 ) 分別和聯(lián)合處理的病變根片的三組作為實(shí)驗(yàn)組，未處理的病變根片作為對照組，共分成四組，之后將培養(yǎng)5 至8代的細(xì)胞分別接種到各組根片上，分別通過細(xì)胞計(jì)數(shù)法、四唑鹽比色法【3 - ( 4 ，5 一d i m e t h y l t h i a z o l 一2 一y O ·2 ，5 - d i p h e n y lt e t r a z o l i u mb r o m i

6、 d e ，M T T ] 和掃描電鏡檢測三種牙周細(xì)胞在不同處理病變牙根表蕊的附著、增殖和形態(tài)。結(jié)果：( 1 ) 細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果：與未處理組相比，P P P 組及根面脫礦組均能促進(jìn)人牙周三種細(xì)胞對病變根面的附著( 尸 O ．0 5 ) ，與單獨(dú)經(jīng)P P P 處理和根面脫礦處理相比，P P P 和報(bào)面脫礦聯(lián)合處理促細(xì)胞附著效果明顯增強(qiáng)( J 口< O ．0 1 ) ；( 2 ) M T T 結(jié)果顯示：來處理組中人三種牙周細(xì)胞體外培養(yǎng)4