白樺脂酸對Jurkat白血病細胞增殖，凋亡的影響及其機制研究.pdf

1、華中科技大學碩士學位論文白樺脂酸對Jurkat白血病細胞增殖，凋亡的影響及其機制研究姓名：陳子申請學位級別：碩士專業(yè)：內科學（血液病學）指導教師：陳燕20080501華中科技大學碩士學位論文華中科技大學碩士學位論文2中文摘要中文摘要目的：目的：觀察白樺脂酸對人T淋巴細胞白血病Jurkat細胞株細胞增殖、細胞凋亡和細胞周期的影響，并探討其分子機制。方法：方法：四甲基偶氮唑藍（MTT）法檢測細胞增殖活性，Hoechst33258染色和Ann

2、exinVPI雙標法檢測細胞凋亡，流式細胞儀檢測細胞周期分布，RTPCR法分析白樺脂酸作用于Jurkat細胞后cyclinD3及bclxlmRNA含量的變化，Westernblotting檢測細胞內cyclinD3及bclxl的蛋白表達。結果：結果：白樺脂酸對Jurkat細胞有明顯的增殖抑制作用，作用24h的IC50值是70.00molL。而對正常人外周血單個核細胞（PBMC）作用不明顯。白樺脂酸可明顯誘導Jurkat細胞凋亡，Hoec

3、hst33258染色可見典型的凋亡小體。AnnxinVPI雙標法顯示，白樺脂酸誘導細胞凋亡呈劑量依賴性，20、60、100molL白樺脂酸作用24h時，凋亡率分別為8.730.32%28.021.26%33.632.04%。白樺脂酸作用Jurkat細胞后主要使細胞周期阻滯于G0G1期，G0G1期細胞比例隨白樺脂酸劑量增大而逐漸增高，而S期細胞比例隨白樺脂酸劑量增大而逐漸降低，對G2M期細胞作用不明顯。RTPCR結果顯示白樺脂酸作用于Ju

4、rkat細胞使cyclinD3及bclxlmRNA含量減少，并與其劑量呈正相關。Westernblotting結果顯示白樺脂酸使cyclinD3及bclxl蛋白表達降低，呈劑量依賴性。結論：結論：白樺脂酸抑制Jurkat細胞增殖并誘導細胞凋亡，可使細胞阻滯于G0G1期。白樺脂酸對正常人外周血單個核細胞無明顯細胞毒作用，而選擇性作用于腫瘤細胞。其抗腫瘤機制可能與下調cyclinD3及bclxl表達有關。關鍵詞：關鍵詞：白樺脂酸；Jurka