白樺脂酸對(duì)Jurkat白血病細(xì)胞增殖，凋亡的影響及其機(jī)制研究.pdf

1、華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論文白樺脂酸對(duì)Jurkat白血病細(xì)胞增殖，凋亡的影響及其機(jī)制研究姓名：陳子申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：內(nèi)科學(xué)（血液病學(xué)）指導(dǎo)教師：陳燕20080501華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論文華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論文2中文摘要中文摘要目的：目的：觀察白樺脂酸對(duì)人T淋巴細(xì)胞白血病Jurkat細(xì)胞株細(xì)胞增殖、細(xì)胞凋亡和細(xì)胞周期的影響，并探討其分子機(jī)制。方法：方法：四甲基偶氮唑藍(lán)（MTT）法檢測(cè)細(xì)胞增殖活性，Hoechst33258染色和Ann

2、exinVPI雙標(biāo)法檢測(cè)細(xì)胞凋亡，流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期分布，RTPCR法分析白樺脂酸作用于Jurkat細(xì)胞后cyclinD3及bclxlmRNA含量的變化，Westernblotting檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)cyclinD3及bclxl的蛋白表達(dá)。結(jié)果：結(jié)果：白樺脂酸對(duì)Jurkat細(xì)胞有明顯的增殖抑制作用，作用24h的IC50值是70.00molL。而對(duì)正常人外周血單個(gè)核細(xì)胞（PBMC）作用不明顯。白樺脂酸可明顯誘導(dǎo)Jurkat細(xì)胞凋亡，Hoec

3、hst33258染色可見典型的凋亡小體。AnnxinVPI雙標(biāo)法顯示，白樺脂酸誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡呈劑量依賴性，20、60、100molL白樺脂酸作用24h時(shí)，凋亡率分別為8.730.32%28.021.26%33.632.04%。白樺脂酸作用Jurkat細(xì)胞后主要使細(xì)胞周期阻滯于G0G1期，G0G1期細(xì)胞比例隨白樺脂酸劑量增大而逐漸增高，而S期細(xì)胞比例隨白樺脂酸劑量增大而逐漸降低，對(duì)G2M期細(xì)胞作用不明顯。RTPCR結(jié)果顯示白樺脂酸作用于Ju

4、rkat細(xì)胞使cyclinD3及bclxlmRNA含量減少，并與其劑量呈正相關(guān)。Westernblotting結(jié)果顯示白樺脂酸使cyclinD3及bclxl蛋白表達(dá)降低，呈劑量依賴性。結(jié)論：結(jié)論：白樺脂酸抑制Jurkat細(xì)胞增殖并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，可使細(xì)胞阻滯于G0G1期。白樺脂酸對(duì)正常人外周血單個(gè)核細(xì)胞無(wú)明顯細(xì)胞毒作用，而選擇性作用于腫瘤細(xì)胞。其抗腫瘤機(jī)制可能與下調(diào)cyclinD3及bclxl表達(dá)有關(guān)。關(guān)鍵詞：關(guān)鍵詞：白樺脂酸；Jurka