紫草素對急性早幼粒細胞白血病NB4細胞增殖凋亡的影響及相關機制的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:
  研究紫草素對人急性早幼粒細胞白血病NB4細胞增殖與凋亡的影響及其相關作用機制。
  方法:
  1.以NB4細胞株作為研究對象,用梯度濃度的紫草素分別作用于NB4細胞不同時間后,CCK-8實驗測定細胞增殖情況;
  2.以0.3μmol/L紫草素作用于NB4細胞,培養(yǎng)1 d后,通過流式細胞術檢測細胞周期的改變和凋亡的改變;
  3.經(jīng)Hochest33342實驗,通過熒光顯微鏡檢測NB4細胞的胞

2、核的形態(tài)學改變;
  4.Western blot檢測細胞c-Myc,PARP,Caspase3,Cleaved PARP,Cleaved Caspase3,ERK,p-ERK,JNK,p-JNK,p38MAPK及p-p38MAPK蛋白表達情況;
  5.構建NB4細胞裸鼠移植瘤模型,通過描繪腫瘤生長曲線分析紫草素對裸鼠腫瘤發(fā)展情況的作用;
  6.通過免疫組化技術檢測紫草素對抑制瘤組織中增殖指標 c-Myc表達的影響

3、。
  結果:
  1. NB4細胞經(jīng)紫草素處理后,細胞活力受到抑制(P<0.01),并且具有時間依賴性及濃度依賴性;
  2.流式細胞術檢測到NB4細胞經(jīng)紫草素處理后,G1期細胞比例上升(P<0.01),G2期和S期細胞比例下降(P<0.01);細胞凋亡率明顯增加(P<0.01);
  3.紫草素處理NB4后,經(jīng)Hochest33342著色,在熒光顯微鏡下發(fā)現(xiàn)細胞表現(xiàn)出核固縮,染色質聚集凝集,核破碎等現(xiàn)象;

4、r>  4.紫草素作用細胞1 d后,Western blot檢測到凋亡相關蛋白Cleaved PARP,Cleaved Caspase3表達明顯增多(P<0.01),p-JNK和p-p38MAPK蛋白水平明顯升高(P<0.01),p-ERK和c-Myc蛋白表達水平明顯降低(P<0.05);
  5.紫草素能夠顯著抑制移植瘤生長(P<0.05);
  6.免疫組化結果顯示,紫草素處理組增殖蛋白c-Myc表達與對照組相比顯著降低

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