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文檔簡介
1、目的:探討白樺脂酸增強抗腫瘤藥物誘導(dǎo)U266細胞凋亡及其機制研究。
方法:用不同濃度的白樺脂酸(20μg/mL,40μg/mL,60μg/mL,80μg/mL)、硼替佐米(10 nmol/L,80 nmol/L,320 nmol/L),沙利度胺(10μg/mL,50μg/mL,100μg/mL)和馬法蘭(5μmol/L,10μmol/L,20μmol/L)及白樺脂酸聯(lián)合不同濃度的硼替佐米,沙利度胺及馬法蘭分別處理U266細胞,
2、MTT法檢測細胞增殖抑制率,Annexin V/PI法流式細胞儀檢測不同濃度硼替佐米、沙利度胺、馬法蘭單獨用藥及分別與白樺脂酸聯(lián)合用藥的各組細胞凋亡率;Real-time PCR檢測Survivin,Cyto-C,Bcl-2,Bax基因表達水平;蛋白免疫印跡法檢測Survivin,Cyto-C,Bcl-2,Bax蛋白表達水平。
結(jié)果:聯(lián)合白樺脂酸用藥組的U266細胞對硼替佐米、沙利度胺及馬法蘭的增殖抑制率顯著高于單用藥組(p<
3、0.05);流式細胞術(shù)結(jié)果顯示:白樺脂酸與硼替佐米聯(lián)合用藥處理多發(fā)性骨髓瘤U266細胞后,10 nmol/L,80 nmol/L,320 nmol/L細胞凋亡率分別為(36.94±0.04)%、(56.73±0.08)%、(78.67±0.03)%;同樣的白樺脂酸和沙利度胺(10μg/mL,50μg/mL,100μg/mL)聯(lián)合用藥后各組的凋亡率分別為(27.32±0.02)%、(46.16±0.03)%、(70.17±0.08)%;白
4、樺脂酸和馬法蘭(5μmol/L,10μmol/L,20μmol/L)聯(lián)合用藥后各組的凋亡率分別為(37.43±0.07)%、(51.78±0.02)%、(74.19±0.05)%,聯(lián)合用藥組合單用藥組比較均有顯著性差異(P<0.05);RT-PCR和Western Blot結(jié)果顯示:聯(lián)合白樺脂酸用藥處理多發(fā)性骨髓瘤U266細胞后Survivin,Bcl-2 mRNA和蛋白表達水平顯著降低(p<0.05);而Cyto-c和Bax表達水平顯
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