重組抗體-granzyme B分子對(duì)腫瘤細(xì)胞特異性殺傷的研究.pdf

1、惡性腫瘤的基因治療是新興的研究領(lǐng)域，具有廣闊的發(fā)展前景。以誘導(dǎo)細(xì)胞死亡作為腫瘤基因治療的手段，必須解決誘導(dǎo)方法的特異、高效、持續(xù)、低毒副作用等問(wèn)題。granzymeB(粒酶B，GrB)是絲氨酸蛋白酶家族的成員，是CTL(細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞)和NK(自然殺傷)細(xì)胞產(chǎn)生的主要?dú)苑肿?。GrB介導(dǎo)的死亡途徑是多層次、多水平的，GrB基因可以作為殺傷腫瘤細(xì)胞的有力工具。本文首先證實(shí)了活性型GrBa基因異位表達(dá)具有細(xì)胞致死效應(yīng)。胞漿中過(guò)表達(dá)的G

2、rBa蛋白通過(guò)自身的絲氨酸蛋白酶活性，切割細(xì)胞內(nèi)重要的結(jié)構(gòu)和功能蛋白，介導(dǎo)轉(zhuǎn)染細(xì)胞死亡。形態(tài)異常的多核巨細(xì)胞是GrBa介導(dǎo)的死亡途徑中特殊的現(xiàn)象，由細(xì)胞骨架和有絲分裂異常所致。將針對(duì)腫瘤抗原HER-2的單鏈抗體基因與活性型GrBa基因用綠膿桿菌外毒素(PE)的轉(zhuǎn)位肽序列相連接，形成Ab-PEⅡ-GrBa(immunoGrB)基因。表達(dá)的immunoGrB蛋白進(jìn)入腫瘤靶細(xì)胞的內(nèi)吞小體后，發(fā)生Arg279和Gly280之間肽鍵的定點(diǎn)裂解，裂