血紅素無污染提取新技術研究.pdf

1、以豬血粉為試驗原料，對傳統(tǒng)制備血紅素的方法進行比較分析，結果發(fā)現(xiàn)雖然目前制備血紅素已有現(xiàn)成的工藝，并且不止一個，但是所有現(xiàn)存工藝都有一個致命缺點:整個生產(chǎn)過程造成嚴重環(huán)境和產(chǎn)品污染，無法實現(xiàn)工業(yè)化。根據(jù)污染產(chǎn)生的階段，現(xiàn)行工藝大體上都可以分為三個相對獨立的工藝階段:
　　 1、原料處理階段:鮮豬血含有大量水分，并且紅細胞破胞釋放Hb過程中大量應用有毒物質氯仿，致使廢液排放嚴重污染環(huán)境。
　　 2、血紅素提取階段:血紅素釋

2、放使用鹽酸作蛋白變性劑，鹽酸使蛋白質過度水解為氨基酸，復合氨基酸價值低廉，無應用價值，排放造成嚴重環(huán)境污染和氣味污染。
　　 3、粗品血紅素提純階段:提純過程中大量使用氯仿和吡啶，氯仿和吡啶有強致癌作用，排放造成嚴重環(huán)境污染，并造成有機溶劑在產(chǎn)品中殘留，產(chǎn)品被污染不能使用，失去了提取價值。由于以上原因，研究一條血紅素提取新工藝成為迫在眉睫的任務。
　　 本試驗在丙酮法基礎上，研究一條無污染血紅素提取工藝，研究內容如下:1

3、）以鮮豬血為原料，探索原料預處理工藝—制備血粉，避開應用氯仿，消除廢液污染;2)探索提取工藝，使廢渣能再利用;3）研究一條無污染純化工藝，避開有毒物質氯仿和吡啶，消除有機溶劑殘留，提高產(chǎn)品質量。具體研究結果如下:
　　 1、血紅素檢測方法研究結果:TLC—UV與液相色譜測定血紅素含量相差0.3％，加樣回收試驗平均回收率在95-105％之間，RSD為3.54％，精密度試驗的變異系數(shù)是0.03％(n=5)，實驗證明血紅素TLC—UV

4、檢測方法準確可行。
　　 2、原料預處理過程中，混合試劑結合超聲波破胞是紅血球破胞效果最好的試驗方法，最佳工藝參數(shù):乙醇量是紅血球量的10％，去離子水是紅血球量的20％，超聲波作用功率200w，作用時間10min;高速離心噴霧干燥機噴頭溫度120℃，轉子轉速35000rad/min，進料流量1.5L/h。
　　 3、改良丙酮法最佳提取工藝:丙酮液用檸檬酸調pH3.0，V丙酮∶m原料=25∶1，m原料∶mNsc(l)=1∶

5、1，超聲波功率150w，處理5min;血紅素粗品分離等電點pH調至4.8。
　　 4、以粗品血紅素為原料，經(jīng)稀堿、稀酸處理，通過正交試驗分析，血紅素最佳純化工藝參數(shù):氫氧化鈉提取液濃度1.5％，粗品血紅素與提取液質量比1∶35，提取時間為10min;每克粗品heme消耗乙醇400mL。
　　 5、提取物定性定量鑒定結果:提取物在波長200-800nm處紫外光譜掃描，對照品與樣品均在(385±1)nm波長處有最大吸收，且掃

6、描結果完全相同;在波長500-4000cm-1處紅外光譜掃描，對照品與樣品在波長3000-3500cm-1處不同，其余部分完全一樣，紫外光譜掃描和紅外光譜掃描結果表明提取物為血紅素;TLC—UV法檢測精制血紅素百分含量為98.76％，并且樣品溶液在24h內穩(wěn)定，精密度RSD=0.31％(n=5)，重復性試驗RSD=0.22％(n=5)。
　　 6、提取物有效性鑒定結果:以缺鐵性貧血結合失血性貧血的試驗方法成功建立大鼠貧血模型，飼