擬穴青蟹生長性狀特性解析及相關(guān)微衛(wèi)星標(biāo)記篩選.pdf

1、擬穴青蟹（Scylla paramamosain)隸屬于甲殼綱（Crustacea)、十足目（Decapoda)、短尾亞目（Brachyura)、梭子蟹科（Portunidae)、青蟹屬（Scylla)，在我國東部沿海廣泛分布。其作為青蟹屬4個(gè)種中的優(yōu)勢(shì)種有著個(gè)體大、生長快、肉味鮮美、營養(yǎng)豐富、適應(yīng)性強(qiáng)等特點(diǎn)，是我國的重要的經(jīng)濟(jì)養(yǎng)殖蟹類之一。隨著市場(chǎng)的需求增加，擬穴青蟹的人工養(yǎng)殖量和捕撈量也逐年增加。然而環(huán)境的惡化、高密度的養(yǎng)殖模式和野

2、生資源的過度捕撈使的擬穴青蟹的種質(zhì)資源快速下滑。在此背景下，構(gòu)建優(yōu)勢(shì)基礎(chǔ)群和遺傳育種變得十分重要。本研究對(duì)擬穴青蟹子一代個(gè)體的16個(gè)生長性狀進(jìn)行測(cè)量和相關(guān)性分析，并鑒定出在雌、雄間顯著差異的生長性狀，通過通徑分析，鑒定出對(duì)體重具有顯著影響的性狀，最后構(gòu)建最優(yōu)線性回歸方程。另外分析了129個(gè)轉(zhuǎn)錄組來源的微衛(wèi)星標(biāo)記與生長性狀的相關(guān)性，旨在為擬穴青蟹新品種培育和分子標(biāo)記輔助育種技術(shù)的建立奠定基礎(chǔ)。所獲得的實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下：
　　1.在擬穴青

3、蟹子一代隨機(jī)選取96個(gè)體，對(duì)96個(gè)體進(jìn)行性別鑒定，和16個(gè)生長性狀的測(cè)量。統(tǒng)計(jì)雌、雄比例，運(yùn)用SPSS軟件分析雌、雄在16個(gè)生長性狀的差異，并分別對(duì)雌、雄的16個(gè)生長性狀間的相關(guān)性和15個(gè)生長性狀對(duì)體重的影響效果進(jìn)行分析，并運(yùn)用通經(jīng)分析分別分析生長性狀對(duì)體重的效應(yīng)。在擬穴青蟹子一代的統(tǒng)計(jì)中發(fā)現(xiàn)雌、雄比例為1:2。對(duì)雌、雄差異性狀的分析中發(fā)現(xiàn)有9個(gè)生長性狀在雌、雄間存在顯著差異。在雌性中16個(gè)生長性狀兩兩的相關(guān)系數(shù)為0.524-0.997

4、。通經(jīng)分析發(fā)現(xiàn)在雌性中，生長性狀甲長和第2側(cè)齒間距對(duì)體重有顯著的直接效應(yīng)，其通徑系數(shù)分別為1.124和-0.186。甲長和第2側(cè)齒間距對(duì)體重的決定系數(shù)分別為1.263和0.035，其復(fù)合相關(guān)指數(shù)為0.951，這表明這兩個(gè)性狀為在雌性個(gè)體中影響體重的主要自變量。在雄性中16個(gè)生長性狀兩兩的相關(guān)系數(shù)為0.881-0.999。通經(jīng)分析表明，在雄性中，性狀體高、大螯掌節(jié)高和第二步足長節(jié)長對(duì)體重有著顯著的直接效應(yīng)，其通徑系數(shù)分別為0.484、0.

5、300和0.225。體高、大螯掌節(jié)高和第二步足長節(jié)長對(duì)體重的決定系數(shù)分別為0.234、0.090和0.051，其的復(fù)合相關(guān)指數(shù)為0.967，這表明在雄性個(gè)體中影響體重的主要自變量為這三個(gè)性狀。另外，構(gòu)建了2個(gè)最優(yōu)線性回歸方程，雌性：Y(體重)=4.969 X1(甲長)–0.758 X2(第2側(cè)齒間距)–140.177，雄性：Y(體重)=3.806 X1(體高)+2.371 X2(大螯掌節(jié)高)+1.725 X3(第二步足長節(jié)長)–123.

6、559。
　　2.應(yīng)用基于454高通量轉(zhuǎn)錄組測(cè)序開發(fā)的129對(duì)微衛(wèi)星標(biāo)記引物，對(duì)擬穴青蟹子一代96個(gè)體進(jìn)行擴(kuò)增，獲得30個(gè)多態(tài)性的微衛(wèi)星標(biāo)記。這30個(gè)微衛(wèi)星標(biāo)記分別在擬穴青蟹子一代的觀測(cè)雜合度為0.19-1.00，期望雜合度為0.23-0.96，PIC為0.21-0.95。通過SPSS軟件對(duì)這30個(gè)微衛(wèi)星標(biāo)記與16個(gè)生長性狀進(jìn)行關(guān)聯(lián)分析。發(fā)現(xiàn)3個(gè)微衛(wèi)星標(biāo)記共與12個(gè)生長性狀連鎖，位點(diǎn)Scpa36與甲長、腹部寬、體高、大螯不動(dòng)指長、

7、大螯掌節(jié)寬、大螯掌節(jié)高、第二步足長節(jié)長、第三步足長節(jié)長8個(gè)生長性狀存在連鎖（P<0.05），位點(diǎn)Scpa75與甲內(nèi)寬、腹部寬、第8齒甲寬、第2側(cè)齒間距、第三步足長節(jié)長5個(gè)生長性狀存在連鎖（P<0.05），位點(diǎn)Spm30與體高、第二側(cè)齒間距、體重3個(gè)生長性狀存在連鎖（P<0.05）。并對(duì)3個(gè)微衛(wèi)星標(biāo)記的每個(gè)微衛(wèi)星標(biāo)記的不同基因型間進(jìn)行多重比較分析，一些基因型（Scpa36的BC, Scpa75的BC和BD, Spm30 AC）在擬穴青蟹部