環(huán)境因子對(duì)擬穴青蟹生理生化影響.pdf

1、運(yùn)用酶學(xué)分析方法和組織學(xué)技術(shù)，研究了水體中不同濃度氨氮、亞硝酸鹽、pH和鹽度脅迫對(duì)擬穴青蟹生理生化以及鰓、肝胰腺顯微結(jié)構(gòu)的影響，探討環(huán)境因子脅迫下擬穴青蟹生理生化的響應(yīng)及免疫防御機(jī)制，以期為其健康養(yǎng)殖和水質(zhì)管理提供理論指導(dǎo)，并為甲殼動(dòng)物環(huán)境生理學(xué)研究積累基礎(chǔ)資料。本試驗(yàn)的主要結(jié)果和結(jié)論如下： 1、氨氮脅迫對(duì)擬穴青蟹生理生化以及鰓、肝胰腺顯微結(jié)構(gòu)的影響 過濾海水中分別添加氨氮(以氯化銨作為氨氮源)0 mg·L-1。(對(duì)照組

2、)、10mg·L-1、20 mg·L-1、30 mg·L-1、40 mg·L-1，脅迫24 h，48 h，72 h，96 h對(duì)擬穴青蟹生理生化及組織、器官顯微結(jié)構(gòu)影響的結(jié)果表明，擬穴青蟹血清PO活性在氨氮脅迫前期(24 h、48h)隨氨氮濃度的升高而增高，而在脅迫后期(72 h、96 h)卻無明顯規(guī)律；各組的擬穴青蟹血清PO活性，脅迫48 h時(shí)最高，與其它各組間差異顯著(P<0.05)，脅迫72 h時(shí)均為最低，這與擬穴青蟹THC變化有些

3、相似，各組擬穴青蟹THC也是在脅迫48 h時(shí)最高，但在脅迫96 h時(shí)最低。此外，高濃度脅迫(C30、C40)時(shí)，擬穴青蟹THC一直處于較低水平，C40組與其它各組間差異顯著(P<0.05)。 擬穴青蟹鰓中SOD活性除C40組外，其余各組在脅迫前期隨氨氮濃度的升高而升高，而在脅迫后期則隨氨氮濃度的升高而下降，C40組擬穴青蟹鰓中SOD活性隨脅迫時(shí)間的延長(zhǎng)而一直呈下降趨勢(shì)；血清SOD活性與鰓SOD活性變化趨勢(shì)相似，但C40組擬穴青蟹

4、血清SOD活性在氨氮脅迫48 h時(shí)最大，且與其它各組間差異顯著(P<0.05)；各組擬穴青蟹肝胰腺和肌肉的SOD活性變化趨勢(shì)與鰓SOD活性相同。各組擬穴青蟹鰓和肌肉的SOD活性與PO活性、THc變化有相似之處，均在脅迫48 h時(shí)最大，肝胰腺SOD活性則在脅迫72 h時(shí)最大。各組擬穴青蟹鰓GSH-PX活性在氨氮脅迫24 h、48 h和72 h時(shí)隨氨氮濃度的升高而下降，脅迫96 h時(shí)隨氨氮濃度的升高而增大；血清GSH-PX活性變化與鰓GSH

5、-PX活性變化趨勢(shì)完全相反，各組擬穴青蟹血清GSH-PX活性在脅迫24 h、48 h和72 h時(shí)，隨氨氮濃度的升高而增大，脅迫96 h時(shí)隨氨氮濃度的升高而下降；各組擬穴青蟹肝胰腺和肌肉GSH-PX活性變化與肝胰腺SOD活性變化相似，C40組肝胰腺GSH-PX活性均在氨氮脅迫48 h時(shí)達(dá)到最大值。血清Uα、UL與肝胰腺SOD活性變化趨勢(shì)相同。 擬穴青蟹鰓Na+-K+-ATPase活性除C40組外，其余各組在氨氮脅迫24 h時(shí)隨氨氮

6、濃度的升高而增大，而在氨氮脅迫48 h、72 h和96 h時(shí)則隨氨氮濃度的升高而下降：C40組擬穴青蟹鰓Na+-K+-ATPase活性隨脅迫時(shí)間的延長(zhǎng)而一直呈下降趨勢(shì)，C40組、C30組與其它各組間差異顯著(P<0.05)，這與THC在高濃度處于較低水平吻合；擬穴青蟹鰓Ca2+-Mg2+-ATPase活性變化趨勢(shì)與Na+-K+-ATPase活性變化相似，但C40組卻隨脅迫時(shí)間的延長(zhǎng)而增強(qiáng)，這可能是擬穴青蟹處于蛻皮前期的生理信號(hào)。

7、 各組擬穴青蟹鰓和肝胰腺ACP活性變化與Ca2+-Mg2+-ATPase活性變化一致；而肌肉ACP活性則隨氨氮濃度的升高和脅迫時(shí)間的延長(zhǎng)而下降，脅迫前期與脅迫后期差異顯著(P<0.05)；鰓AKP活性在脅迫24 h、72 h和96 h時(shí)隨氨氮濃度的升高而下降，但在脅迫48 h時(shí)卻隨著氨氮濃度的升高而增大；肝胰腺和肌肉的AKP活性變化與血清SOD活性變化一致。 擬穴青蟹鰓及肝胰腺組織細(xì)胞結(jié)構(gòu)在氨氮脅迫下發(fā)生了氧化損傷，作用于鰓上皮

8、細(xì)胞及肝胰腺肝小管引起細(xì)胞結(jié)構(gòu)受損，影響了擬穴青蟹組織、器官正常的生理生化功能，且這種損傷隨著水體中氨氮濃度的升高而加劇。 2、亞硝酸鹽脅迫對(duì)擬穴青蟹生理生化影響 過濾海水中分別添加NO2-N(以亞硝酸鈉為亞硝酸氮源)濃度分別為0.00mg·L-1、0.25 mg·L-1、0.50 mg·L-1、1.00 mg·L-1、1.50 mg·L-1、2.00 mg·L-1，脅迫48 h、96 h和144 h時(shí)對(duì)擬穴青蟹生理生化

9、影響的結(jié)果表明，各組擬穴青蟹血清PO、肌肉和肝胰腺的SOD活性、Uα以及肌肉AKP活性和肝胰腺UL均隨NO2-N濃度的升高和脅迫時(shí)間的延長(zhǎng)而逐漸下降，肌肉和肝胰腺的ACP活性、肝胰腺AKP活性和肌肉UL則逐漸升高。 3、pH脅迫對(duì)擬穴青蟹生理生化影響 將海水pH分別調(diào)節(jié)到4.5，6.0，7.5，9.0，10.5，研究擬穴青蟹在pH脅迫24 h、72 h、120 h、168 h和216 h時(shí)的結(jié)果表明，pH對(duì)擬穴青蟹血清P

10、O和SOD活性及Uα影響顯著，對(duì)肌肉和肝胰腺SDO活性影響顯著(P<0.05)；相同pH下肝胰腺SOD活性差異顯著(P<0.05)。 4、鹽度脅迫對(duì)擬穴青蟹生理生化影響 將海水鹽度分別調(diào)節(jié)為5，15，25，35，研究擬穴青蟹在鹽度脅迫24 h、48h、72 h和96 h的結(jié)果表明，鹽度顯著影響擬穴青蟹血清PO活性和SOD活性，且表現(xiàn)出明顯的時(shí)間效應(yīng)性，各組擬穴青蟹在鹽度低于或高于25時(shí)，其肌肉SOD活性升高，同濃度組的擬

11、穴青蟹肝胰腺SOD活性則隨著鹽度脅迫時(shí)間的延長(zhǎng)而呈現(xiàn)出先降后升的趨勢(shì)；鰓中Na+-K+-ATPase、Ca2+-Mg2+-ATPase活性隨鹽度降低均升高，隨著脅迫時(shí)間延長(zhǎng)，Na+-K+-ATPase活性呈現(xiàn)不同的變化規(guī)律，且趨于平緩。肌肉ACP活性隨著鹽度的升高而呈小幅度下降，而肝胰腺ACP活性則呈小幅度升高。不同脅迫時(shí)間同一鹽度組肌肉ACP活性有升有降；肌肉、肝胰腺AKP活性隨著鹽度升高而升高；隨著脅迫時(shí)間延長(zhǎng)，同一鹽度組肌肉AKP