擬穴青蟹脂肪營養(yǎng)生理研究.pdf

1、擬穴青蟹（Scylla paramamosain）是我國青蟹的常見種，亦是華南地區(qū)主要的養(yǎng)殖蟹類。目前，缺乏相應(yīng)的人工配合飼料，是制約擬穴青蟹人工養(yǎng)殖進(jìn)一步發(fā)展的原因之一。研究青蟹的營養(yǎng)需求，對于開發(fā)營養(yǎng)均衡、成本經(jīng)濟(jì)以及環(huán)境友好的青蟹飼料有重要意義。脂肪是飼料中重要的組成成分之一，它不僅可以為甲殼動物提供能量和必需脂肪酸，也是生物膜結(jié)構(gòu)的主要構(gòu)成部分，參與體內(nèi)脂溶性維生素轉(zhuǎn)運(yùn)，是類花生酸、激素和輔酶因子的前體物質(zhì)。許多因素會影響動物對

2、脂肪的利用，如脂肪的來源、脂肪的含量、脂肪酸的組成、飽和與不飽和脂肪酸的比例等。研究擬穴青蟹的脂肪營養(yǎng)代謝，有助于為擬穴青蟹人工配合飼料的研發(fā)提供數(shù)據(jù)參考，為甲殼動物脂質(zhì)代謝提供理論資料。因此，本研究的主要目的是，通過測定飼料中不同脂肪源和不同脂肪水平對擬穴青蟹相關(guān)生理生化指標(biāo)，探討飼料脂肪源或脂肪水平對青蟹的影響；并通過分析測定攝食不同脂肪水平飼料青蟹的血清生化指標(biāo)，探討擬穴青蟹攝食后，其血液中脂質(zhì)代謝情況；同時(shí)分析不同脂肪源和脂肪水

3、平對擬穴青蟹FAS活性和mRNA相對表達(dá)的影響，以討論飼料中脂肪源和脂肪水平對青蟹脂肪合成的影響。具體實(shí)驗(yàn)與結(jié)果如下：
　　1.不同脂肪源飼料對擬穴青蟹的影響
　　本實(shí)驗(yàn)將魚油、豬油、紅花油、紫蘇籽油和混合油（魚油：紅花油：紫蘇籽油=1：1：1）作為脂肪源，按8％添加水平，分別配制成五種等氮等脂的半純化飼料，并用一種海洋雙殼類動物,紅肉籃蛤，作為對照組餌料（飼料分別命名字為FO、LD、SO、PO、MO和CF），飼喂擬穴青蟹幼

4、蟹6周。實(shí)驗(yàn)青蟹分為6個(gè)處理，每個(gè)處理設(shè)三個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)25只青蟹（初重7.43±0.32g，殼寬3.52±0.25cm）。結(jié)果顯示MO處理組的青蟹存活率最高。飼喂SO飼料的青蟹粗蛋白和粗脂肪含量最低。肝胰腺總脂含量最高值出現(xiàn)在LD處理組，而肌肉總脂最高含量出現(xiàn)在FO處理組。LD處理組青蟹的血糖、總膽固醇和低密度脂蛋白含量較高，而高密度脂蛋白較低。青蟹組織脂肪酸的組成和所飼喂的實(shí)驗(yàn)飼料脂肪酸組成一致。飼喂LD飼料的青蟹生長狀況、飼料利

5、用指標(biāo)以及血清中相關(guān)酶活性都明顯較低。而肝胰腺的丙二醛含量以及抗氧化酶活性都在LD處理組有最大值。
　　2.不同脂肪水平飼料對擬穴青蟹的影響
　　本實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)制作了五種實(shí)驗(yàn)飼料，通過飼喂擬穴青蟹幼蟹8周，然后從生長、飼料利用、體成分和抗氧化等指標(biāo)來評價(jià)各實(shí)驗(yàn)飼料的效果，以確定擬穴青蟹幼蟹的脂肪最適量。這五種等氮等能的實(shí)驗(yàn)飼料（45%粗蛋白）分別添加0%，3％，6%、9%和12%的油脂（飼料分別命名為L0、L3、L6、L9和L1

6、2），隨機(jī)飼喂五個(gè)處理組，每個(gè)處理設(shè)置三個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)20只青蟹（初重11.53±0.52g，殼寬3.92±0.14cm）。結(jié)果顯示L6處理組青蟹的存活率、終體重、終殼寬、特定生長率和蛻殼頻率顯著高于 L0、L3和L12。最高飼料轉(zhuǎn)化率及最低蛋白質(zhì)效率出現(xiàn)在L0處理組。L3處理組的青蟹日攝食率最高。全蟹的粗脂肪及肝胰腺總脂肪含量在各處理組中，隨著飼料中脂肪含量的升高而明顯增加。青蟹肝胰腺中飽和脂肪酸和單不飽和脂肪酸在 L0處理組所占比

7、例最高。青蟹肌肉和肝胰腺中的脂肪酸組成與其飼喂的飼料中的脂肪酸相對應(yīng)。L12處理組青蟹肝胰腺中積累的丙二醛含量高于其他處理組?？寡趸傅幕钚噪S著飼料中脂肪含量的增加而增強(qiáng)。血液生化指標(biāo)中總膽固醇和總蛋白在L3處理組有最大值，而血糖在L6處理組有最大值。血液中溶菌酶活性、堿性磷酸酶和酸性磷酸酶活性在L9處理組達(dá)到最大值。
　　3.飼料脂肪水平對擬穴青蟹攝食后血清生化指標(biāo)的影響
　　本實(shí)驗(yàn)用高、中、低三種脂肪水平飼料（L0，L6

8、和L12）飼喂青蟹（初重20.33±0.76g，殼寬4.53±0.29cm）35天后，禁食24h，再投喂相應(yīng)飼料，在攝食0h，12h，24h，36h，48h后，分別測定各處理組青蟹的血清生化指標(biāo)，以探討青蟹在飼喂不同脂肪水平飼料后，體內(nèi)脂質(zhì)代謝過程。結(jié)果顯示，三個(gè)處理組的青蟹血糖在攝食后12h都達(dá)到最大值，之后濃度逐漸回落。L0和L6處理組在攝食后12h出現(xiàn)最大總蛋白（TP）值，而L12處理組TP在攝食后24h出現(xiàn)。血清中甘油三酯、高密

9、度脂蛋白和低密度脂蛋白的影響不顯著，僅見攝食后12h時(shí)，L6和L12處理組的總膽固醇明顯高于L0處理組青蟹。L12處理組青蟹的谷草轉(zhuǎn)氨酶（GOT）活性始終顯著高于L0和L6處理組。而L0和L12同在攝食后24h出現(xiàn)最大GOT值。L12處理組的青蟹谷丙轉(zhuǎn)氨酶（GPT）值同樣始終顯著高于L0和L6處理組。L6處理組的GPT和GOT各時(shí)段之間沒有出現(xiàn)明顯差異。
　　4.飼料脂肪源脂肪水平對擬穴青蟹FAS活性和mRNA表達(dá)的影響
　

10、　本實(shí)驗(yàn)測定了擬穴青蟹肌肉和肝胰腺中脂肪酸合成酶(FAS)的相對表達(dá)量，并分析飼喂不同脂肪源或脂肪水平飼料對青蟹FAS活性和mRNA表達(dá)量的影響。結(jié)果顯示，青蟹肝胰腺中FAS mRNA表達(dá)量顯著高于肌肉組織。FO、MO和PO處理組的FAS活性與對照組CF青蟹沒有顯著差異。隨著飼料中脂肪水平的升高，F(xiàn)AS活性和mRNA的相對表達(dá)量逐漸減低，F(xiàn)AS活性和mRNA的表達(dá)在L12處理組有最小值，而在L0處理組有最大值。
　　綜上所述，本論

11、文的研究結(jié)果顯示：
　?。?）與生物餌料相比，以魚油和混合油作為脂肪源制作的顆粒飼料對擬穴青蟹幼蟹具有更好的生長作用，值得注意的是，在飼料加工過程中，飼料中n-6/n-3脂肪酸的比例應(yīng)不大于1；
　?。?）飼料中的脂肪水平為8.52%~11.63%（最適含量9.5%）時(shí)，可以使擬穴青蟹幼蟹維持穩(wěn)定的生長和抗氧化能力；
　　（3）高脂肪飼料可能會對青蟹肝胰腺結(jié)構(gòu)造成損傷，從而影響其營養(yǎng)吸收和免疫能力。另外，低飼料脂肪水平