轉(zhuǎn)AtNHX1基因楊樹的培育及其耐鹽性的鑒定.pdf

1、本研究以歐美楊107莖段為材料，建立高效組培再生體系，確立了適宜的莖段再生不定芽的培養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基。采用根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)法，將擬南芥Na<'+>/H<'+>逆向轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(Na<'+>/H<'+>antiporter)基因(AtNHX1)首次轉(zhuǎn)入楊樹，并進(jìn)行了功能驗(yàn)證。 本實(shí)驗(yàn)研究得出莖段分化的最適培養(yǎng)基為MS+0.5 mg·L<'-1> 6-BA+0.1 mg·L<'-1>NAA，分化率為100％，這為遺傳轉(zhuǎn)化工作提供了堅(jiān)實(shí)的基

2、礎(chǔ)。 遺傳轉(zhuǎn)化過程中卡那霉素作為遺傳轉(zhuǎn)化的篩選劑，它的最佳濃度為70 mg·L<'-1>；農(nóng)桿菌LBA4404的最適濃度是OD<,600>=0.5，侵染10～15 min；外植體預(yù)培養(yǎng)2 d，共培養(yǎng)2 d。 對(duì)再生植株進(jìn)行PCR檢測(cè)、PCR產(chǎn)物基因測(cè)序和楊樹基因組DNA的Southern檢測(cè)，證實(shí)已獲得126株轉(zhuǎn)AtNHX1基因的楊樹植株。 轉(zhuǎn)基因植株的功能驗(yàn)證表明，在不同濃度的NaCl的處理下，植物的凈光合