乙肝病毒前C區(qū)-BCP區(qū)變異與慢加急性肝衰竭關系的研究.pdf

1、目的：探討乙肝病毒前C區(qū)/BCP區(qū)變異與乙肝相關性慢加急性肝衰竭(HBV-related ACLF)的關系。
　　方法：收集44例ACLF患者和28例慢性乙型肝炎患者(chronic hepatitis B，CHB)的血清及臨床資料，并對其中10例ACLF患者進行隨訪，每1周收集血清一次。依據(jù)MELD評分對ACLF患者的病情進行判斷。采用巢氏PCR方法擴增HBVDNA，擴增的產(chǎn)物直接測序，序列比對采用BioEdit(7.0.9.0

2、)生物分析軟件。采用熒光定量PCR法檢測HBV DNA含量。數(shù)據(jù)分析采用SPSS13.0軟件，計量資料數(shù)據(jù)以(均數(shù)±標準差)表示，兩組間比較采用t檢驗及t’檢驗。組間變異情況采用Chi-Square Test分析、Fisher’s Exact Test分析，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。
　　結(jié)果：
　　一、臨床數(shù)據(jù)分析性別：ACLF組男31例，女13例，CHB組男20例，女8例。兩組性別比較無差異；
　　年齡：A

3、CLF與CHB組年齡分別為(51.64±10.89)vs(38.65±10.52)歲，ACLF組年齡比CHB組年齡偏大(P=-0.000)；
　　肝功能：ALB、ALT、TBIL在ACLF組和CHB組的情況分別為：(26.41±3.47)vs(42.45±5.67)(g/L)、(2.08±0.47)vs(1.92±0.47)log10(U/L)、(2.21±0.40)vs(1.09±0.66)log10(μmol/L)，ACLF組

4、ALB明顯低于CHB組，而TBIL明顯高于CHB組(P值均小于0.05)：
　　HBV DNA：ACLF組和CHB組HBV DNA定量值分別為：(5.47±1.20)vs(7.42±1.29)(copies/mL，log10)，ACLF組較CHB組低，差異有統(tǒng)計學意義(P=0.000)；
　　HBeAg：ACLF組中HBeAg(+)者19例，HBeAg(-)25例，CHB組中HBeAg(+)者21例，HBeAg(-)7例(P

5、=0.008)。
　　二、測序結(jié)果分析1.基因型：根據(jù)測得的S區(qū)基因序列判斷HBV的基因型，ACLF組患者基因型均為C型，CHB組患者2例為B型，其余均為C型，兩組差異無統(tǒng)計學意義(P=0.148)。
　　2.ACLF組和CHB組前C/BCP區(qū)變異的比較：兩組患者在A1762T、G1764A、T1753V、G1896A、G1899A變異頻率ACLF組高于CHB組，上述變異位點在兩組之間的差異均具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。

6、A1846T、C1766T、T1768A、T1853C變異頻率ACLF組高于CHB組，但兩組差異不具有統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
　　3.ACLF和CHB患者前C/BCP區(qū)聯(lián)和變異分析：A1762T+G1764A、G1896A+G1899A、T1753V+A1762T+G1764A、G1896A+G1899A+A1762T+G1764A、A1762T+G1764A+G1896A聯(lián)合變異頻率ACLF組高于CHB組，差異在兩組之間均

7、具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，T1753V+A1762T+G1764A+G1896A+G1899A聯(lián)合變異頻率ACLF組高于CHB組，差異在兩組之間不具有統(tǒng)計學意義(X2=3.419，p=0.064)。
　　4.ACLF和CHB患者變異情況的比較：將乙肝病毒的變異情況分為四種，分別是：前C區(qū)、BCP區(qū)均無變異，僅BCP區(qū)變異，僅前C區(qū)變異和雙區(qū)變異。雙區(qū)均有變異的頻率ACLF組顯著高于CHB組[79.55％(35/44)vs39

8、.29％(11/28)]，兩者差異具有統(tǒng)計學意義(X2=12.021，P=0.001)。僅BCP區(qū)有變異的頻率CHB組高于ACLF組[42.86％(12/28)vs20.45％(9/44)]，差異具有統(tǒng)計學意義(X2=4.157，P=0.041)。前C區(qū)、BCP區(qū)無變異的頻率CHB組為17.86％(5/28)，ACLF組為2.27％(1/44)，CHB顯著高于ACLF，差異具有統(tǒng)計學意義(X2=5.440，P=0.020)。兩組均未出現(xiàn)

9、單獨的前C區(qū)變異。
　　5.ACLF組不同MELD評分患者變異情況的比較：根據(jù)MELD評分將44例患者分為<20、20～25、>25組，分別比較了A1762T、G1764A、T1753V、G1896A、G1899A、A1846T及A1762T+G1764A、G1896A+G1899A、T1753V+A1762T+G1764A、G1896A+G1899A+A1762T+G1764A、A1762T+G1764A+G1896A、T175

10、3V+G1896A+G1899A+A1762T+G1764A聯(lián)合變異的變異頻率，結(jié)果各組之間差異均無統(tǒng)計學差異(P>0.05)。
　　6.10例ACLF患者隨訪期間乙肝病毒變異位點和MELD評分的變化情況：10例患者入選時均存在3個或3個以上的聯(lián)合變異位點；G1896A、G1899A、T1753C、A1846T變異隨著病情好轉(zhuǎn)而恢復。
　　結(jié)論：
　　乙肝病毒前C區(qū)/BCP區(qū)變異頻率ACLF患者明顯高于CHB患者，兩者