小鼠胚胎心臟發(fā)育過(guò)程中轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子受體TβRI、TβRII的表達(dá)特點(diǎn).pdf

1、本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用免疫組化方法對(duì)TGF β s受體T β RⅠ、T β RⅡ在小鼠胚胎心臟發(fā)育過(guò)程中的時(shí)空表達(dá)規(guī)律進(jìn)行了研究。 研究方法：應(yīng)用光鏡石蠟連續(xù)切片，免疫組化PAP法，用抗TGF β 1、抗T β RⅠ和抗T β RⅡ多克隆抗體，以及抗α-SMA、抗α-SCA單克隆抗體對(duì)胚齡9-14天小鼠胚胎心臟連續(xù)切片進(jìn)行了染色。 研究結(jié)果：胚胎發(fā)育至第9天，原始心管為單一管狀結(jié)構(gòu)，外包心肌，腔面襯有內(nèi)皮，內(nèi)皮與心肌之間的心膠質(zhì)中尚

2、未出現(xiàn)間充質(zhì)細(xì)胞。原始心管的流出道，原始心室、心房心肌均顯較強(qiáng)的α-SMA．和α-SCA表達(dá)。TGF β 1、T β RⅠ與T β RⅡ在流出道心肌的表達(dá)呈陰性，僅在流出道近心室部心肌可見(jiàn)較弱的T β RⅠ陽(yáng)性顆粒。TGF β 1、T β RⅠ和T β RⅡ在心室、心房均呈顆粒狀表達(dá)，陽(yáng)性顆粒主要位于近腔面的心肌細(xì)胞，但T β RⅠ和T β RⅡ的表達(dá)強(qiáng)度較TGF β 1高，尤以心室表達(dá)明顯，隨心肌向流入道端移行，表達(dá)強(qiáng)度逐漸降低。

3、 胚胎發(fā)育第10天，心肌性流出道長(zhǎng)度明顯增加，流出道心肌的遠(yuǎn)側(cè)界位于和心包腔背側(cè)壁臟壁中胚層上皮的反折處，顯較強(qiáng)α-SCA和α-SMA表達(dá)。TGF β 1，T β RⅠ與T β RⅡ在流出道心肌呈陽(yáng)性表達(dá)，尤以右側(cè)壁明顯，但隨流出道心肌向動(dòng)脈端延伸，表達(dá)逐漸減弱，和α-SCA、α-SMA染色相比，T β RⅠ與T β RⅡ表達(dá)尚未完全到達(dá)流出道動(dòng)脈端心肌。TGFβ1、T β RⅠ和T β RⅡ在心室和心房的表達(dá)明顯增強(qiáng)，T β RⅠ

4、的表達(dá)強(qiáng)度明顯高于TGF β 1和T β RⅡ。靜脈竇左右角明顯可見(jiàn)，α-SMA和α-SCA的表達(dá)沿靜脈竇左右角背側(cè)壁延伸至心背系膜反折處。TGF β 1、T β RⅠ和T β RⅡ的表達(dá)主要集中在靜脈竇左角，在靜脈竇右角和心背系膜，三種蛋白質(zhì)的表達(dá)陰性或弱陽(yáng)性。胚胎發(fā)育第11-12天，TGFβ1、TβRⅠ、TβRⅡ和α-SMA在心臟不同部位的表達(dá)達(dá)高峰并延伸至竇房結(jié)心肌。流出道長(zhǎng)度進(jìn)一步增加，但α-SCA表達(dá)在流出道遠(yuǎn)端明顯減弱。TG

5、Fβ1、TβRⅠ與TβRⅡ在流出道和α-SMA的表達(dá)模式基本相同，其遠(yuǎn)端均達(dá)心包腔背側(cè)壁臟壁中胚層上皮和流出道的反折處。流出道心內(nèi)膜墊中α-SMA陽(yáng)性間充質(zhì)細(xì)胞顯示較強(qiáng)的TβRⅡ表達(dá)，房室管表面的內(nèi)皮細(xì)胞及心內(nèi)膜墊間充質(zhì)細(xì)胞均顯較強(qiáng)的TGFβ1、TβRⅠ和TβRⅡ表達(dá)。胚胎發(fā)育第11天始，動(dòng)脈囊、弓動(dòng)脈壁以及升主動(dòng)脈和肺動(dòng)脈干壁顯較強(qiáng)的α-SMA染色，提示平滑肌細(xì)胞開(kāi)始發(fā)育，但TGFβ1、TβRⅠ與TβRⅡ在流出道的表達(dá)始終限于心肌細(xì)胞

6、。胚胎發(fā)育至12天晚，TGFβ1、TβRⅠ和TβRⅡ在心臟各部的表達(dá)開(kāi)始下降。胚胎發(fā)育第14天，TGFβ1、TβRⅠ和TβRⅡ的表達(dá)已局限于右心室部分致密心肌和小梁心肌。 研究結(jié)論：本實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明，TGFβs受體TβRⅠ和TβRⅡ在小鼠胚胎心臟發(fā)育過(guò)程中的表達(dá)具時(shí)空特異性，TβRⅠ和TβRⅡ的表達(dá)模式和TGFβs的表達(dá)模式相同。胚胎發(fā)育第9-10天，TβRⅠ和TβRⅡ的表達(dá)主要集中在原始心室心肌，在流出道和靜脈竇右角，可見(jiàn)α-S

7、CA和α-SMA表達(dá)陽(yáng)性的心肌細(xì)胞，但TGFβ1、TβRⅠ和TβRⅡ表達(dá)陰性，提示TGFβ信號(hào)系統(tǒng)的表達(dá)是在間充質(zhì)細(xì)胞向心肌細(xì)胞分化以后，TGFβ信號(hào)系統(tǒng)并不影響心肌細(xì)胞的早期定向分化。TGFβ1、TβRⅠ和TβRⅡ集中表達(dá)在9-14天胚胎心臟的心肌和心內(nèi)膜墊組織，提示Tβ RⅠ和TβRⅡ不但調(diào)節(jié)心肌細(xì)胞的增生和進(jìn)一步分化，同時(shí)在心臟成袢和外形建立過(guò)程，內(nèi)部分隔時(shí)心內(nèi)膜墊的內(nèi)皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化、心內(nèi)膜墊間充質(zhì)細(xì)胞的增生以及神經(jīng)嵴細(xì)胞向流出道