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文檔簡介
1、目的: 探討褪黑素(Melatonin,MT)對于高糖條件下培養(yǎng)的大鼠腎小球系膜細胞(Mesangial cell,MC)增殖、凋亡和細胞周期的影響。
方法: 透射電鏡觀察大鼠腎小球系膜細胞凋亡的形態(tài)學變化;四甲基偶氮唑藍(MTT)比色法檢測細胞增殖;流式細胞儀檢測細胞周期及凋亡率;逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶聯(lián)擴增法(RT-PCR)、免疫細胞化學結(jié)合計算機圖文分析系統(tǒng)檢測凋亡相關蛋白細胞色素C(cytochrome C,Cyt-C)、
2、Bax、Bcl-2和Caspase-3的表達改變。
結(jié)果: 電鏡觀察系膜細胞凋亡形態(tài)學變化,結(jié)果顯示與高糖組相比褪黑素處理組凋亡形態(tài)表現(xiàn)不明顯;結(jié)合MTT與細胞周期結(jié)果分析顯示,褪黑素不能促進大鼠系膜細胞增殖,但對其有保護作用;流式細胞儀表明褪黑素對于30mmol/L濃度的葡萄糖誘導的腎小球系膜細胞高凋亡率有明顯的抑制作用(P<0.05),呈劑量依賴性趨勢;RT-PCR、免疫細胞化學提示褪黑素能明顯抑制Cyt-C和Casp
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