甲羥戊酸對(duì)人類(lèi)系膜細(xì)胞增生及細(xì)胞周期的影響.pdf

1、目的：探討甲羥戊酸(MVA)和洛伐他汀(LOV)對(duì)人類(lèi)腎小球系膜細(xì)胞(HMC)增殖的直接影響及對(duì)細(xì)胞周期的作用，從而為探討抑制系膜細(xì)胞增生的決策和他汀類(lèi)藥物的多效性提供理論依據(jù)。 方法：人系膜細(xì)胞株由中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué)惠贈(zèng)。以1640培養(yǎng)液懸浮HMC在50 ml培養(yǎng)瓶中，37℃，5％CO<,2>培養(yǎng)箱中孵育。第一步試驗(yàn)分8組：10％胎牛血清的RPMI1640培養(yǎng)液為空白對(duì)照組，MVA給藥組根據(jù)濃度分為7個(gè)組(1nmol/L、10n

2、mol/L、100nmol/L、1μmol、10μmol/L、100μmol/L、1mmol/L)，在48 h用MTT比色法測(cè)細(xì)胞增殖程度。對(duì)促增生最明顯的劑量組(100nmol/L)在12、24、48 h用同樣的方法測(cè)細(xì)胞增殖程度。第二步試驗(yàn)分4組：正常對(duì)照組(10％FCS RPMll640培養(yǎng)液)、MVA組(100nmol/L)、LOV組(10um/LLOV)、MVA干預(yù)組(10um/LLOV+100nm/LMVA)在24，48 h

3、分別用MTT比色法檢測(cè)細(xì)胞增殖程度，流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期。用酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀檢測(cè)不同濃度MVA以及10um/LLOV以及100nm/LMVA干預(yù)作用作用下HMC在490nm波長(zhǎng)處的光吸收(A<,490nm>)值以測(cè)定不同濃度和時(shí)間點(diǎn)MVA和LOV對(duì)HMC增殖的影響。用流式細(xì)胞儀測(cè)定HMC的細(xì)胞周期G<,1>(DNA合成前期)與S(DNA合成期)的比率，觀察LOV以及100nm//LMVA對(duì)HMC增殖及周期進(jìn)展的影響。 結(jié)論：MV

4、A是HMC增殖的促進(jìn)劑，加速細(xì)胞周期進(jìn)展。LOV抑制HMC增殖，阻滯細(xì)胞周期進(jìn)展，MVA可逆轉(zhuǎn)其抑制作用。 1、10-100 nmol/L范圍內(nèi)MVA是HMC增殖的促進(jìn)劑，且作用呈濃度依賴性。MVA濃度過(guò)高時(shí)抑制細(xì)胞增生，考慮與致細(xì)胞毒性有關(guān)。 2、100 nmol/LMVA對(duì)HMC的增殖作用在12～48 h內(nèi)呈時(shí)間依賴性。 3、10um/LLOV抑制系膜細(xì)胞增生，且抑制作用可被100 nmol/L MVA所逆轉(zhuǎn)