Zwittermicin A生物合成相關基因tzwM、tzwO的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本文對Zwittermicin A生物合成相關基因tzwM、tzwO進行了探討。本研究分別克隆了tzwM和tzwO的全長基因，并在大腸桿菌BL21中進行了融合表達及純化。通過等位基因交換的方法，構建了tzwM基因突變盒M和tzwO基因突變盒O，分別將其插入溫度敏感的E. coli-Bt穿梭載體pRN5101得到突變質(zhì)粒pRNM和pRNO。導入產(chǎn)Zwittennicin A的Bt菌株G03，經(jīng)高溫突變分別獲得tzwM、tzwO的突變株各3

2、株，將tzwM的突變株命名：G03△tzwM-101，G03△tzwM-140和G03△tzwM-262，將tzwO的突變體命名為：G03△tzwO-89，G03△tzwO-144和G03△tzwO-184。運用Southern blotting的方法，分別驗證了突變體G03△tzwM-101和G03△tzwO-184的正確性；通過其對歐文氏桿菌的抑菌活性表明各突變株均喪失了抑菌活性；質(zhì)譜分析未檢測到ZwittermicinA；對突變體

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