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文檔簡介
1、本文以非躍變型果實‘洛陽青’枇杷為材料,研究了不同發(fā)育階段和采后貯藏條件下果實乙烯生物合成及相關基因表達,探索了乙烯生物合成調(diào)控枇杷果實發(fā)育、成熟衰老及非生物逆境響應的相關生物學機制。主要研究結果如下:
根據(jù)果皮色澤指標(CCI),將枇杷果實發(fā)育階段分為五個時期:SI(CCI:<-9)、S2(CCI:-6~-4)、S3(CCI:-1~1,轉(zhuǎn)色期)、S4(CCI:3~5)、S5(CCI:9~11)(成熟采收期)。結果發(fā)現(xiàn):‘
2、洛陽青’果實發(fā)育過程乙烯釋放量和呼吸強度均呈峰型變化趨勢,且均在轉(zhuǎn)色期(S3)達到高峰;采后20℃貯藏果實乙烯釋放量和呼吸強度都很低且呈下降趨勢,0℃貯藏顯著抑制果實乙烯釋放和呼吸強度。
利用簡并引物,從枇杷中克隆得到三個乙烯生物合成相關基因成員,分別為EjACS1、EjACO1和EjACO2,序列分析表明它們分別與PbACS2(94%),MdACO1(96%),PPACO1(96%)有最高的氨基酸序列一致性。
3、 利用實時定量PCR(Q-PCR)研究基因表達,結果顯示:EjACS1和EjACO1表達具有果實組織特異性,而EjACO2在葉,花,果實中均有較高表達;果實發(fā)育階段EjACO2的表達模式與乙烯變化趨勢一致,在轉(zhuǎn)色期果實中EjACO2基因表達最強,EjACS1和EjACO1在果實發(fā)育后期表達增強;果實采后20℃貯藏過程中三個基因表達都維持在較低水平,且EjACS1和EjACO2呈下降的表達模式;0℃貯藏下,EjACS1和EjACO2表達
4、略微上升并高于常溫對照果實;20℃低濕條件下貯藏6~8 d的果實中EjACS1、EjACO1和EjACO2表達顯著下降;機械傷處理誘導果實中EjACS1和EjACO2的表達,但EjACO1表達基本維持穩(wěn)定。
本試驗首次從枇杷中克隆獲得三個乙烯生物合成相關基因并進行基因表達研究,發(fā)現(xiàn)果實發(fā)育階段轉(zhuǎn)色期乙烯和呼吸均呈峰型變化趨勢,EjACO2可能是其關鍵基因,參與果實成熟啟動;果實采后不同貯藏條件下,三個基因呈現(xiàn)不同表達模式,
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