樺木酸對(duì)人肺癌細(xì)胞A549和Lewis肺癌小鼠的抗腫瘤作用.pdf

1、肺癌是近幾年來(lái)死亡率和發(fā)病率都較高的惡性腫瘤之一，占全球癌癥病死人數(shù)的三分之一，是影響人類健康的第一殺手。雖然近些年來(lái)在肺癌的藥物治療和控制術(shù)后的轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)上取得了較大的進(jìn)展，但患者的總體成活率和生活質(zhì)量仍不理想。目前為了控制肺癌的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移，主要的手段仍然是化療，但是其毒性作用和多重耐藥性限制了它的進(jìn)一步發(fā)展。生物藥制劑具有毒副作用小的優(yōu)點(diǎn)，能夠從整體上改善體內(nèi)微環(huán)境，對(duì)于患者生活質(zhì)量的提高和生存期的延長(zhǎng)有著顯著的作用，其還可以有效的降

2、低放化療的毒副反應(yīng)，防止腫瘤轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)，特別是在中晚期腫瘤的治療上優(yōu)勢(shì)突出。因此開(kāi)發(fā)此種高效、低毒的生物藥劑成為了人類迫切的需要。
　　樺木酸能夠從桉樹(shù)球、桑白皮、胡蘆巴、杜仲、酸棗仁、樺樹(shù)皮等多種植物中通過(guò)提取法得到。由于提取率低，目前市售的樺木酸主要是通過(guò)樺木醇經(jīng)化學(xué)合成法得到。近幾年國(guó)內(nèi)外對(duì)于樺木酸的研究取得了一些進(jìn)展，發(fā)現(xiàn)其對(duì)于惡性皮膚黑痣瘤、肝細(xì)胞癌等惡性腫瘤具有明顯的抑腫瘤增殖作用，但是對(duì)于肺癌是否具有抑制作用和具體作用

3、機(jī)制仍不十分明確。
　　本實(shí)驗(yàn)?zāi)康模貉芯繕迥舅釋?duì)Lewis肺癌荷瘤小鼠和人肺癌A549細(xì)胞株的抑瘤作用，以抑瘤率為指標(biāo)優(yōu)選樺木酸給藥劑量，并探究其抑瘤的作用機(jī)制，為開(kāi)發(fā)天然抗腫瘤藥物提供可靠依據(jù)。
　　方法：
　　1、體外實(shí)驗(yàn)部分：樺木酸對(duì)人肺癌A549細(xì)胞株的增殖抑制作用及機(jī)制研究。建立人肺癌A549細(xì)胞模型，將細(xì)胞分為蒸餾水組、順鉑組、樺木酸低劑量組、樺木酸中劑量組、樺木酸高劑量組，共5組。含藥血清作用24小時(shí)后，

4、 M TT法檢測(cè)人肺癌A549模型細(xì)胞存活率，光鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)，流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)人肺癌A549細(xì)胞株細(xì)胞周期，酶聯(lián)免疫法（ELISA)檢測(cè)人肺癌A549細(xì)胞中 caspase-3蛋白表達(dá)。
　　2、體內(nèi)實(shí)驗(yàn)部分：樺木酸對(duì)Lew is肺癌荷瘤小鼠的抑瘤作用及機(jī)制研究。
　　采用小鼠腋下接種法建立Lew is肺癌荷瘤小鼠模型，將造模成功的小鼠隨機(jī)分為蒸餾水組、順鉑組、樺木酸低劑量組、樺木酸中劑量組、樺木酸高劑量組，共5組。給藥期

5、間持續(xù)灌胃樺木酸，給藥過(guò)程中，隔天測(cè)量并計(jì)算小鼠實(shí)體瘤體積；給藥2周后，取材實(shí)體瘤組織、胸腺、脾臟、血液，稱重并計(jì)算腫瘤生長(zhǎng)抑制率、胸腺指數(shù)、脾指數(shù)；實(shí)體瘤進(jìn)行病理組織學(xué)檢測(cè)；酶聯(lián)免疫法(ELISA)分別檢測(cè)荷瘤小鼠血清中、瘤組織中casepase-3、XIAP蛋白表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　1、體外實(shí)驗(yàn)部分：
　　樺木酸作用于人肺癌A549細(xì)胞株后，細(xì)胞生存率明顯降低，樺木酸中劑量組和高劑量組相較低劑量組效果更加明顯；細(xì)

6、胞周期受阻滯于G0/G1期；細(xì)胞中 caspase-3表達(dá)量升高，與模型組相比差異顯著（P＜0.05)，其中以樺木酸高劑量組效果最顯著。
　　2、體內(nèi)實(shí)驗(yàn)部分：
　　樺木酸作用于Leiws肺癌荷瘤小鼠模型后，腫瘤生長(zhǎng)抑制率顯著升高，樺木酸高劑量組相較低劑量組和重計(jì)量組效果更加明顯；瘤組織見(jiàn)大片壞死，瘤細(xì)胞散在分布；荷瘤小鼠血清中、瘤組織中caspase-3表達(dá)量升高，XIAP表達(dá)量降低，與模型組相比差異顯著（P＜0.05)，

7、其中以樺木酸高劑量組效果最顯著。
　　結(jié)論：
　　1、體外實(shí)驗(yàn)部分
　　樺木酸對(duì)人肺癌A549細(xì)胞株有增殖抑制作用，且樺木酸中、高劑量組組優(yōu)于樺木酸低劑量組；樺木酸能阻滯人肺癌A549細(xì)胞細(xì)胞周期于G0/G1期，并上調(diào)人肺癌A549細(xì)胞中 caspase-3的表達(dá)，其中以樺木酸高劑量組效果最顯著。
　　2、體內(nèi)實(shí)驗(yàn)部分
　　樺木酸對(duì)Lew is肺癌荷瘤小鼠有抑瘤作用，且樺木酸高組優(yōu)于樺木酸低劑量組和中劑量組