帶蒂脂肪組織復(fù)合rhBMP-2應(yīng)用于兔脊柱融合的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目 的 脊柱融合(Spinal Fusion)是治療脊柱疾病的主要方法之一，而橫突間脊柱融合是脊柱融合的常用方法。目前，臨床上常利用自體骨或同種異體骨移植來進(jìn)行脊柱融合，但是，由于脊柱融合需骨量大，自體骨很難滿足臨床需要，另外，自體骨還存在塑形困難，術(shù)中出血量增多，術(shù)后供區(qū)疼痛等缺點(diǎn)，而異體骨移植也存在排斥反應(yīng)，疾病傳播等缺點(diǎn)。尋求一種理想的骨移植替代材料成為脊柱融合研究的熱點(diǎn)。 本實(shí)驗(yàn)采用纖維蛋白凝膠(Fibrin

2、Glue，F(xiàn)G)作為載體，與骨形態(tài)發(fā)生蛋白(Bone Morphogenetic Protein，BMP)復(fù)合，用帶血管蒂脂肪組織包裹進(jìn)行兔橫突間脊柱融合。檢測兔橫突間脊柱融合情況，以期為脊柱融合提供更為有效的方法。 方 法 (一)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組 將40只一歲齡日本大耳白兔隨機(jī)分為2組，每組20只，單純脂肪組織，脂肪組織復(fù)合rhBMP-2組。 (二)FG及FG復(fù)合rhBMP-2的配制 將纖維蛋白、

3、凝血酶、CaCl<,2>等材料按一定方法配制可得到FG，用于對照組，加入rhBMP-2用于實(shí)驗(yàn)組。 (三)動(dòng)物模型建立 顯露左側(cè)第5、第6腰椎橫突，以磨鉆將其后方骨質(zhì)磨去，露出松質(zhì)骨及髓腔，將頸部脂肪分離，翻轉(zhuǎn)、加入FG或FG+ rhBMP-2植入動(dòng)物左側(cè)第5、第6腰椎橫突后側(cè)。術(shù)后6、8周，處死動(dòng)物取材，應(yīng)用大體觀察，手法檢測，影像學(xué)觀察，生物力學(xué)檢測以及組織學(xué)觀察，對有關(guān)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 結(jié) 果

4、 6周時(shí)，脂肪組織復(fù)合rhBMP-2組有部分成骨，8周時(shí)脂肪組織復(fù)合rhBMP-2組有明顯骨形成，而單純脂肪組在6-8周時(shí)均沒有成骨。 討 論 骨形態(tài)發(fā)生蛋白能誘導(dǎo)宿主的間充質(zhì)干細(xì)胞向骨前體細(xì)胞分化。BMP在骨發(fā)生的過程中主要起3個(gè)作用：促進(jìn)細(xì)胞的趨化、有絲分裂和細(xì)胞的分化。 脂肪組織中除含有大量的成熟脂肪細(xì)胞外，還有一些結(jié)締組織基質(zhì)，這些結(jié)締組織基質(zhì)存在脂肪基質(zhì)細(xì)胞，其間又存在一些具有多向分化潛能的成體干細(xì)胞

5、。它也能分化為脂肪細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、成骨細(xì)胞和成肌細(xì)胞。帶蒂的脂肪組織含有血管，因此含有從血管運(yùn)輸來的細(xì)胞如間充質(zhì)干細(xì)胞和血管周圍的細(xì)胞如血管周細(xì)胞等，而這兩種細(xì)胞都是多功能干細(xì)胞，在體內(nèi)和體外具有多種細(xì)胞分化能力。本實(shí)驗(yàn)采用帶蒂的脂肪組織，在分離過程中會(huì)破壞脂肪組織內(nèi)部分小的血管，這樣血液中的間充質(zhì)干細(xì)胞就會(huì)進(jìn)入脂肪組織與脂肪基質(zhì)細(xì)胞、血管周細(xì)胞一起向成骨細(xì)胞轉(zhuǎn)化，形成骨組織。 脂肪組織有取材廣泛，對機(jī)體損傷小的特點(diǎn)。因此利用帶